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阳光雨露118

新虫 (正式写手)

[求助] 蛋白酶酶活的测定 已有1人参与

各位大神,本人在做蛋白酶,目前进行到酶活的测定,但用福林试剂法测定的时候遇到一些问题:对照组和实验组一样显蓝色,且对照组(即空白组)颜色较深,与实验组差别不大,具体实验操作如下:取一支离心管,加入1mL稀释酶液,置入400C水浴中预热3~5min,再加入预热至400C 的2%酪蛋白溶液1mL,准确及时保温10min。立即加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液,15min后离心分离或用滤纸过滤。吸取1mL清液,加5mL0.4mol/L碳酸钠溶液,最后加入1mL福林—酚试剂,摇匀,于400C水浴中显色20min。另取一支离心管为空白管。在空白管中先加入1mL稀释酶液,再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液,再加1mL2% 酪蛋白溶液,15min后离心分离或用滤纸过滤。另取一支离心管为空白管。在空白管中先加入1mL稀释酶液,再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液,再加1mL2% 酪蛋白溶液,15min后离心分离或用滤纸过滤。
        所以,我的问题是空白组为什么会显色,怎么解决这个问题?
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挖煤工人牛三斤

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 啦呼啦呼啦 at 2019-12-30 17:22:57
你好,请问你的问题解决了吗

你的问题解决了么?我也遇到空白对照有颜色的问题,我三氯乙酸终止的问题,还是酪蛋白的问题?
5楼2023-04-24 08:27:56
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啦呼啦呼啦

新虫 (初入文坛)

你好,请问你的问题解决了吗

发自小木虫Android客户端
2楼2019-12-30 17:22:57
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晴天阴阴

新虫 (初入文坛)

离心要多少转啊?
good luck
3楼2023-01-14 14:12:36
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lpc_1993

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

买个测蛋白的试剂盒,参考一下它的说明书,基本上我认为他们优化的已经很好了
4楼2023-03-10 00:53:22
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