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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 蛋白酶酶活的测定
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阳光雨露118

新虫 (正式写手)

[求助] 蛋白酶酶活的测定 已有1人参与

各位大神，本人在做蛋白酶，目前进行到酶活的测定，但用福林试剂法测定的时候遇到一些问题：对照组和实验组一样显蓝色，且对照组（即空白组）颜色较深，与实验组差别不大，具体实验操作如下：取一支离心管，加入1mL稀释酶液，置入400C水浴中预热3~5min，再加入预热至400C 的2%酪蛋白溶液1mL，准确及时保温10min。立即加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液，15min后离心分离或用滤纸过滤。吸取1mL清液，加5mL0.4mol/L碳酸钠溶液，最后加入1mL福林—酚试剂，摇匀，于400C水浴中显色20min。另取一支离心管为空白管。在空白管中先加入1mL稀释酶液，再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液，再加1mL2% 酪蛋白溶液，15min后离心分离或用滤纸过滤。另取一支离心管为空白管。在空白管中先加入1mL稀释酶液，再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液，再加1mL2% 酪蛋白溶液，15min后离心分离或用滤纸过滤。
        所以，我的问题是空白组为什么会显色，怎么解决这个问题？
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1楼 2019-01-02 14:57:03
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啦呼啦呼啦

新虫 (初入文坛)
你好，请问你的问题解决了吗

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2楼2019-12-30 17:22:57
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晴天阴阴

新虫 (初入文坛)
离心要多少转啊？
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good luck
3楼2023-01-14 14:12:36
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lpc_1993

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

买个测蛋白的试剂盒，参考一下它的说明书，基本上我认为他们优化的已经很好了
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4楼2023-03-10 00:53:22
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挖煤工人牛三斤

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 啦呼啦呼啦 at 2019-12-30 17:22:57
你好，请问你的问题解决了吗

你的问题解决了么？我也遇到空白对照有颜色的问题，我三氯乙酸终止的问题，还是酪蛋白的问题？
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5楼2023-04-24 08:27:56
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tiyyabai

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 挖煤工人牛三斤 at 2023-04-24 08:27:56
你的问题解决了么？我也遇到空白对照有颜色的问题，我三氯乙酸终止的问题，还是酪蛋白的问题？...

我也遇到了这个问题

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6楼2023-05-16 14:04:56
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baolaoda

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 挖煤工人牛三斤 at 2023-04-24 08:27:56
你的问题解决了么？我也遇到空白对照有颜色的问题，我三氯乙酸终止的问题，还是酪蛋白的问题？...

请问问题解决了吗

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我是一个好姑娘~
7楼2023-05-23 17:57:27
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挖煤工人牛三斤

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by tiyyabai at 2023-05-16 14:04:56
我也遇到了这个问题
...

我的问题是酪素配置浓度的问题，酪素浓度高了，空白对照有颜色

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8楼2023-05-30 14:04:58
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挖煤工人牛三斤

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by baolaoda at 2023-05-23 17:57:27
请问问题解决了吗
...

我的问题是酪素浓度的原因，酪素浓度偏高了，导致空白对照有颜色

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9楼2023-05-30 14:05:35
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