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蛋白酶酶活的测定已有1人参与
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各位大神,本人在做蛋白酶,目前进行到酶活的测定,但用福林试剂法测定的时候遇到一些问题:对照组和实验组一样显蓝色,且对照组(即空白组)颜色较深,与实验组差别不大,具体实验操作如下:取一支离心管,加入1mL稀释酶液,置入400C水浴中预热3~5min,再加入预热至400C 的2%酪蛋白溶液1mL,准确及时保温10min。立即加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液,15min后离心分离或用滤纸过滤。吸取1mL清液,加5mL0.4mol/L碳酸钠溶液,最后加入1mL福林—酚试剂,摇匀,于400C水浴中显色20min。另取一支离心管为空白管。在空白管中先加入1mL稀释酶液,再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液,再加1mL2% 酪蛋白溶液,15min后离心分离或用滤纸过滤。另取一支离心管为空白管。在空白管中先加入1mL稀释酶液,再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液,再加1mL2% 酪蛋白溶液,15min后离心分离或用滤纸过滤。 所以,我的问题是空白组为什么会显色,怎么解决这个问题? |
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