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victory8737

铜虫 (初入文坛)

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[交流] 关于基因克隆的一些问题（有效期至2009年6月1日）

我在做基因克隆的时候，遇到一个问题。就是在用设计的引物PCR跑出目标带后，进行切胶回收，连接转化等步培养。最后菌液pcr得到与之前回收时相同大小的带，送去测序，结果却并不是我所要克隆的那个基因

。请大家帮帮我，这是怎么回事？谢谢啦

[ Last edited by sanko211 on 2009-4-30 at 22:13 ]

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1楼2009-04-30 21:40:22

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dameng19831128

银虫 (小有名气)

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★ ★ ★
victory8737(金币+1,VIP+0): 5-1 17:24
victory8737(金币+1,VIP+0):跟我的问题有些相关。我是按照EST序列设计的引物，没道理跑出来的目标带是错的啊？？ 5-1 17:31
victory8737(金币+1,VIP+0): 5-1 17:32

你的引物是按照dna序列设计还是按照cDNA序列设计的？
很可能用设计的引物PCR跑出的目标带就不对。