24小时热门版块排行榜    

查看: 353  |  回复: 3
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 求助定点突变方法?

哪位虫友用QuikChange® XL Site-Directed Mutagenesis Kit的方法做过定点突变?具体怎么操作?大家交流一下啊!
回复此楼

» 猜你喜欢

一个人可以不成功,但不可以不成长!
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

谢谢楼上两位的指导!
一个人可以不成功,但不可以不成长!
4楼2009-04-29 17:22:17
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

大致了解一点点,
目的片段首尾设计一对引物p1,p2
在需要突变的位点设计一对引物P3,p4。(此时引物中设计出你需要突变的碱基,突变点最好在引物中间位置)
引物P1p4以目的片段为模板扩出片段T1(回收纯化)
p3p2以目的片段为模板扩出片段T2(回收纯化)
引物p1p2以T1,T2同时为模板扩得片段T3。然后就是以各种方法检测是否突变成功了。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-04-29 16:02:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenaozhao

QuikChange® XL Site-Directed Mutagenesis Kit试剂盒不错,但很贵,可以买一个高保真pfu,再买一个DpnI, 按照QuikChange® XL Site-Directed Mutagenesis Kit方法做就可以了,引物设计在stratagene网站上有。很简单。试一试就知道了。
3楼2009-04-29 16:16:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856求调剂 +3 zhn03 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:02 by Ainin_
[考研] 考研调剂 +5 来好运来来来 2026-03-21 6/300 2026-03-25 18:53 by 来好运来来来
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:38 by cocolv
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 0854 考研调剂 招生了!AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +5 谷雨上岸 2026-03-23 6/300 2026-03-24 16:32 by laoshidan
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 一志愿国科过程所081700,274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 一志愿南昌大学,327分,材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见