24小时热门版块排行榜    

查看: 347  |  回复: 3
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 求助定点突变方法?

哪位虫友用QuikChange® XL Site-Directed Mutagenesis Kit的方法做过定点突变?具体怎么操作?大家交流一下啊!
回复此楼

» 猜你喜欢

一个人可以不成功,但不可以不成长!
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenaozhao

QuikChange® XL Site-Directed Mutagenesis Kit试剂盒不错,但很贵,可以买一个高保真pfu,再买一个DpnI, 按照QuikChange® XL Site-Directed Mutagenesis Kit方法做就可以了,引物设计在stratagene网站上有。很简单。试一试就知道了。
3楼2009-04-29 16:16:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

大致了解一点点,
目的片段首尾设计一对引物p1,p2
在需要突变的位点设计一对引物P3,p4。(此时引物中设计出你需要突变的碱基,突变点最好在引物中间位置)
引物P1p4以目的片段为模板扩出片段T1(回收纯化)
p3p2以目的片段为模板扩出片段T2(回收纯化)
引物p1p2以T1,T2同时为模板扩得片段T3。然后就是以各种方法检测是否突变成功了。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-04-29 16:02:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

谢谢楼上两位的指导!
一个人可以不成功,但不可以不成长!
4楼2009-04-29 17:22:17
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:11 by 海嵙Y
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂; 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 化工专硕342,一志愿大连理工大学,求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 272求调剂 +5 材紫有化 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:51 by gaoxiaoniuma
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业,申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见