24小时热门版块排行榜    

查看: 416  |  回复: 3
当前主题已经存档。

Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 求助定点突变方法?

哪位虫友用QuikChange® XL Site-Directed Mutagenesis Kit的方法做过定点突变?具体怎么操作?大家交流一下啊!
回复此楼
一个人可以不成功,但不可以不成长!
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

大致了解一点点,
目的片段首尾设计一对引物p1,p2
在需要突变的位点设计一对引物P3,p4。(此时引物中设计出你需要突变的碱基,突变点最好在引物中间位置)
引物P1p4以目的片段为模板扩出片段T1(回收纯化)
p3p2以目的片段为模板扩出片段T2(回收纯化)
引物p1p2以T1,T2同时为模板扩得片段T3。然后就是以各种方法检测是否突变成功了。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-04-29 16:02:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenaozhao

QuikChange® XL Site-Directed Mutagenesis Kit试剂盒不错,但很贵,可以买一个高保真pfu,再买一个DpnI, 按照QuikChange® XL Site-Directed Mutagenesis Kit方法做就可以了,引物设计在stratagene网站上有。很简单。试一试就知道了。
3楼2009-04-29 16:16:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

谢谢楼上两位的指导!
一个人可以不成功,但不可以不成长!
4楼2009-04-29 17:22:17
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Anson1358 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +35 医学老男孩 2026-08-13 83/4150 2026-08-17 20:08 by 医学老男孩
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +4 angus9576 2026-08-17 8/400 2026-08-17 17:26 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见