应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 大肠杆菌表达GFP但是没有表达出来
61/1返回列表
查看: 2087  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

mmiaomi

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌表达GFP但是没有表达出来

请各位大神帮帮忙，我从pCAMBIA1302(植物双元表达载体)中克隆GFP基因，插入pDE2(原核表达载体)，转入大肠杆菌，用IPTG诱导表达，但是没有看到荧光。。是哪一步有问题呢？T﹏T

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-11-26 09:11:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)
换pet28载体吧，表达效果杠杠的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2018-11-27 22:06:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
你可以先不考虑荧光，先确定一下蛋白有没有表达，没表达是质粒构建的问题，表达的话就要考虑表达量的问题
赞一下 回复此楼
···
3楼2018-11-28 14:38:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mmiaomi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小冀- at 2018-11-28 14:38:57
你可以先不考虑荧光，先确定一下蛋白有没有表达，没表达是质粒构建的问题，表达的话就要考虑表达量的问题

有什么办法可以确定蛋白的表达呢？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2018-11-29 09:39:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mmiaomi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2018-11-27 22:06:59
换pet28载体吧，表达效果杠杠的

pet28a是不是只是在bl21中表达呢？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2018-11-29 09:39:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
4楼: Originally posted by mmiaomi at 2018-11-29 09:39:04
有什么办法可以确定蛋白的表达呢？
...

提一下蛋白，跑个胶就好了
赞一下(1人) 回复此楼
···
6楼2018-11-29 09:41:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mmiaomi 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 +8 妮妮ninicgb 2026-03-15 12/600 2026-03-19 05:55 by anny19840123
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-16 10/500 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 9/450 2026-03-18 15:05 by stone_128
[考研] 307求调剂 +3 冷笙123 2026-03-17 3/150 2026-03-18 09:55 by macy2011
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 296求调剂 +5 大口吃饭 身体健 2026-03-13 5/250 2026-03-17 21:05 by 不惑可乐
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧， 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭