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microRNA分析问题 已有1人参与
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| 要定量microRNA，先RT再qPCR，用的是TaqMan的试剂，请问大家RT的时候内参U6和我的特异性RT引物要加在一个体系里的意思吗，还是分开两个体系加？第一次做不清楚，说明书上也没有。谢谢，万分感谢@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan |
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3楼2018-11-24 17:55:32
2楼2018-11-24 17:51:31
GRUBBY_WU
铁杆木虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-11-25 09:14:28
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特异性茎环引物反转做mirna定量pcr，u6和目的的mirna一体做rt，再做qpcr，不然做标准化没有意义。如果要检测a、b，c三种mirna，可以分别用a、b、c与u6反转，这样比较准确。用多对引物做反转很正常的。 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2018-11-24 22:01:44
5楼2018-11-24 22:31:21