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求助关于基因全长
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| 请教各位高手，我现在得到一段400bp左右的片段，请问怎么样才能得到基因全长呢？如果拿不到全长基因，这段片段往下还能做些什么呢？我是绝对新手，请多帮忙！ |
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3楼2009-04-17 11:05:39
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lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢，欢迎常来生物版~ 4-20 12:39
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢，欢迎常来生物版~ 4-20 12:39
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先把片段放ESTscan上面，扫描一下，看看方向性，是否基因全长，或者NCBIblast与相近物种基因进行比较，推断一下，找一下阅读框，能否翻译出完整蛋白质， 不是全长的话，依据他设计引物，去3‘和5’race，race完去除引物序列，BLast检验扩出的是否目的片段，如果是拼接(dnaSTAR ASSEMBLE),拼完后找出阅读框，在阅读框2端设计引物，RTPCR扩出完整CDS，或者在基因组上walking 这段序列还可以作为探针，去掉CDNA文库或者DNA文库，筛出基因的全长 [ Last edited by gastrodia on 2009-4-17 at 11:44 ] |
4楼2009-04-17 11:43:35