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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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如梦微酸

新虫 (初入文坛)

[求助] 甲醇诱导毕赤酵母表达 已有2人参与

我把菌放在50ml的BMGY里面培养,然后诱导的时候是用的25ml的BMMY,菌体挺多的,BMMY的量会不会有点少?

@youlinglyw @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 苦逼的孩 at 2019-11-29 00:12:51
你好,楼主,我现在也在做这个实验,最近也碰到了同样的问题,诱导不出来,应该从哪方面着手改进呢,您后期解决了这个问题了吗,

请确定好前面基因重组没有问题,此外不知道你的目的基因上是否带有标签?若有的话可以取诱导完的上清做一下ELISA,看是否有蛋白表达,然后根据结果来进行下一步实验
7楼2019-11-30 10:23:31
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jianghuqixia

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不会的,有时候优化也会加这一项,就是采取不同的BMMY体积来重悬酵母菌体
微生物发酵
2楼2018-11-01 20:09:59
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如梦微酸

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jianghuqixia at 2018-11-01 20:09:59
不会的,有时候优化也会加这一项,就是采取不同的BMMY体积来重悬酵母菌体

我今天诱导好了,然后取上清,盐析蛋白,发现表达量少的可怜,几乎没有。是不是诱导的时候菌体量太多,BMMY有点不够

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3楼2018-11-02 23:41:08
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xmcsxq0606

新虫 (正式写手)

我们都用5ml诱导的 3d就可以

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-11-04 21:07:57
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