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gemin2008

银虫 (正式写手)

[交流] 巨噬细胞污染问题

我养巨噬细胞(J773,1640培养基),发现铺满的细胞上面到处长着一簇簇的黑色海绵状东西,有的看着像死了的细胞串,还随着培养液飘动,过一天,结果发现,细胞全死了,培养瓶里全是那种黑色海绵状东西。!请问各位大虾,是污染了吗?
黑色的是什么东西啊 ?
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cpu2004

金虫 (小有名气)

如果是支原体感染也有可能,爆发式死亡,会有死亡细胞成簇装
9楼2009-04-25 20:31:29
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cleaner8665

金虫 (正式写手)

★ ★
gemin2008(金币+1,VIP+0):是霉菌吗? 4-13 07:58
gemin2008(金币+1,VIP+0):是霉菌吗? 4-13 07:59
感觉90%就是污染了,絮状的应该是霉菌污染。这个季节很容易没霉菌污染。前一段我们实验室污染了一大批细胞,主要就是这种霉菌,絮状的,刚开始比较少,以为是细胞死亡剧团,但以后越来越多,而且感觉絮状的颗粒太小,肯定不是细胞。

建议楼主把细胞清理出来,培养箱要用75酒精擦拭,最好再照紫外一晚,细胞室也要照紫外,照前最好用新洁尔灭或者75的酒精擦拭桌面,拖地。紫外照一夜。

但愿楼主细胞在冰箱或者液氮里还冻得有。。。。



[ Last edited by cleaner8665 on 2009-4-12 at 23:47 ]
小时候的梦想并不是要当什么科学家,幻想自己是地主家的少爷,家有良田千顷,终日不学无术......
2楼2009-04-12 23:45:35
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gemin2008

银虫 (正式写手)

:)

问题是那些黑色海绵组织先是有细胞形态的,到后面旧。。。。。
什么霉菌这么厉害,有研究吗?
3楼2009-04-13 08:01:30
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cleaner8665

金虫 (正式写手)


gemin2008(金币+1,VIP+0):谢谢! 我今天看到可能是一种叫做黑胶虫的污染了,你也查查,看看是不? 4-13 21:41
肯定是霉菌了,一般细菌污染在高倍镜下呈黑色小点(倒置相差显微镜)存在,我见过的污染中只有霉菌剧团成絮状。
估计刚开始时 细胞型态是污染初期部分细胞死亡,死细胞聚团,而后,霉菌迅速增值,形成较大的絮状物,由于体积粗大,倒置相差显微镜下看起来比较黑。
霉菌很强的,37度,培养箱的高湿度,良好培养基,霉菌肯定涨疯了,而且如果是能产孢子的霉菌通过孢子空气散播,培养箱里再鼓风,包子进入培养瓶的几率大大增加。

霉菌增值速度比细胞快得多了,楼主养的还是巨噬细胞,不可能像你说的貌似污染物的长的那末快,我养肿瘤细胞也长不过霉菌的,同时霉菌生长产毒素,细胞早晚要全军覆没。

不过话说回来,楼主养的巨噬细胞,应当对轻微的细菌或者霉菌有吞噬作用的吧。

对于楼主提问,可以分析一下,既然是显微镜下,肯定是微生物污染,细菌污染大多见得是散在性分布(液体培养基,应该和液体培养的细菌状态类似),即使聚团也应该是促使死细胞聚团。支原体,衣原体污染镜下看不到,微生物太小。原虫类体型比较大,不会那么小。所以嫌疑最大的只能是霉菌,霉菌聚团性很强。

至于是什么菌种,没有深究过,楼主有兴趣可以通过微生物方法鉴定一下。

[ Last edited by cleaner8665 on 2009-4-13 at 10:47 ]
小时候的梦想并不是要当什么科学家,幻想自己是地主家的少爷,家有良田千顷,终日不学无术......
4楼2009-04-13 10:33:18
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