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gemin2008实习版主
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巨噬细胞污染问题
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我养巨噬细胞（J773，1640培养基），发现铺满的细胞上面到处长着一簇簇的黑色海绵状东西，有的看着像死了的细胞串，还随着培养液飘动，过一天，结果发现，细胞全死了，培养瓶里全是那种黑色海绵状东西。！请问各位大虾，是污染了吗？ 黑色的是什么东西啊 ？ |
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cleaner8665
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gemin2008(金币+1,VIP+0):是霉菌吗？ 4-13 07:58
gemin2008(金币+1,VIP+0):是霉菌吗？ 4-13 07:59
gemin2008(金币+1,VIP+0):是霉菌吗？ 4-13 07:58
gemin2008(金币+1,VIP+0):是霉菌吗？ 4-13 07:59
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感觉90%就是污染了，絮状的应该是霉菌污染。这个季节很容易没霉菌污染。前一段我们实验室污染了一大批细胞，主要就是这种霉菌，絮状的，刚开始比较少，以为是细胞死亡剧团，但以后越来越多，而且感觉絮状的颗粒太小，肯定不是细胞。 建议楼主把细胞清理出来，培养箱要用75酒精擦拭，最好再照紫外一晚，细胞室也要照紫外，照前最好用新洁尔灭或者75的酒精擦拭桌面，拖地。紫外照一夜。 但愿楼主细胞在冰箱或者液氮里还冻得有。。。。  [ Last edited by cleaner8665 on 2009-4-12 at 23:47 ] |
2楼2009-04-12 23:45:35
gemin2008
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3楼2009-04-13 08:01:30
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gemin2008(金币+1,VIP+0):谢谢！ 我今天看到可能是一种叫做黑胶虫的污染了，你也查查，看看是不？ 4-13 21:41
gemin2008(金币+1,VIP+0):谢谢！ 我今天看到可能是一种叫做黑胶虫的污染了，你也查查，看看是不？ 4-13 21:41
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肯定是霉菌了，一般细菌污染在高倍镜下呈黑色小点（倒置相差显微镜）存在，我见过的污染中只有霉菌剧团成絮状。 估计刚开始时 细胞型态是污染初期部分细胞死亡，死细胞聚团，而后，霉菌迅速增值，形成较大的絮状物，由于体积粗大，倒置相差显微镜下看起来比较黑。 霉菌很强的，37度，培养箱的高湿度，良好培养基，霉菌肯定涨疯了，而且如果是能产孢子的霉菌通过孢子空气散播，培养箱里再鼓风，包子进入培养瓶的几率大大增加。 霉菌增值速度比细胞快得多了，楼主养的还是巨噬细胞，不可能像你说的貌似污染物的长的那末快，我养肿瘤细胞也长不过霉菌的，同时霉菌生长产毒素，细胞早晚要全军覆没。 不过话说回来，楼主养的巨噬细胞，应当对轻微的细菌或者霉菌有吞噬作用的吧。 对于楼主提问，可以分析一下，既然是显微镜下，肯定是微生物污染，细菌污染大多见得是散在性分布（液体培养基，应该和液体培养的细菌状态类似），即使聚团也应该是促使死细胞聚团。支原体，衣原体污染镜下看不到，微生物太小。原虫类体型比较大，不会那么小。所以嫌疑最大的只能是霉菌，霉菌聚团性很强。 至于是什么菌种，没有深究过，楼主有兴趣可以通过微生物方法鉴定一下。 [ Last edited by cleaner8665 on 2009-4-13 at 10:47 ] |
4楼2009-04-13 10:33:18
cleaner8665
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gemin2008
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