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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 全式金pEASY-Blunt平末端连不上
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王文钊-

木虫 (小有名气)

[求助] 全式金pEASY-Blunt平末端连不上 已有1人参与

大家好，现在遇到了一个问题。我在扩基因的时候用的东洋纺的KOD酶，对目的条带进行回收，胶回收产物浓度大概20-120之间不等，平末端载体用的全式金的pEASY-Blunt，比例和时间严格按照说明书来的，做了好多次转化了，一个阳性克隆都没有。。。。之前做都很好连的，最近不知道怎么了，请有经验的虫子们帮忙指点指点~！
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1楼 2018-10-25 16:27:34
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青绦

新虫 (正式写手)
是不是酶过期了？我感觉全式金的不好用

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6楼2019-01-10 22:51:05
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elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-11-10 22:39:22
胶回收产物浓度大概20-120之间不等？
这个你是怎么测的？一般来说胶回收试剂盒都是高盐成分，溶胶以后，盐很难去除，所以你去测260/280基本上没有太大意义，最重要的是回收率用琼脂糖凝胶电泳检测才是王道，比值只是一个参考！还有问题欢迎交流
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2楼2018-10-26 12:04:00
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王文钊-

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by elmanbio at 2018-10-26 12:04:00
胶回收产物浓度大概20-120之间不等？
这个你是怎么测的？一般来说胶回收试剂盒都是高盐成分，溶胶以后，盐很难去除，所以你去测260/280基本上没有太大意义，最重要的是回收率用琼脂糖凝胶电泳检测才是王道，比值只 ...

产物浓度用核酸定量仪测的
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3楼2018-11-10 19:36:29
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青绦

新虫 (正式写手)
换一家公司的

发自小木虫Android客户端
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4楼2018-11-24 09:32:58
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