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王文钊-

木虫 (小有名气)

[求助] 全式金pEASY-Blunt平末端连不上已有1人参与

大家好,现在遇到了一个问题。我在扩基因的时候用的东洋纺的KOD酶,对目的条带进行回收,胶回收产物浓度大概20-120之间不等,平末端载体用的全式金的pEASY-Blunt,比例和时间严格按照说明书来的,做了好多次转化了,一个阳性克隆都没有。。。。之前做都很好连的,最近不知道怎么了,请有经验的虫子们帮忙指点指点~!
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elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-11-10 22:39:22
胶回收产物浓度大概20-120之间不等?
这个你是怎么测的?一般来说胶回收试剂盒都是高盐成分,溶胶以后,盐很难去除,所以你去测260/280基本上没有太大意义,最重要的是回收率用琼脂糖凝胶电泳检测才是王道,比值只是一个参考!还有问题欢迎交流
2楼2018-10-26 12:04:00
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王文钊-

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by elmanbio at 2018-10-26 12:04:00
胶回收产物浓度大概20-120之间不等?
这个你是怎么测的?一般来说胶回收试剂盒都是高盐成分,溶胶以后,盐很难去除,所以你去测260/280基本上没有太大意义,最重要的是回收率用琼脂糖凝胶电泳检测才是王道,比值只 ...

产物浓度用核酸定量仪测的
3楼2018-11-10 19:36:29
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青绦

新虫 (正式写手)

4楼2018-11-24 09:32:58
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青绦

新虫 (正式写手)

5楼2018-11-24 09:33:24
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青绦

新虫 (正式写手)

是不是酶过期了?我感觉全式金的不好用

发自小木虫Android客户端
6楼2019-01-10 22:51:05
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