| 查看: 1156 | 回复: 11 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
daidai0124木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助】超滤能否脱盐和浓缩一步完成啊?
|
||
|
本人主要是从发酵液中提取酶(分子量55000左右),文献上一般的步骤是先用硫酸铵沉淀,然后透析,再用超滤浓缩,最后冷冻干燥,但从超滤原理上看只要选好合适的超滤膜也应该可以直接脱盐,也就是硫酸铵沉淀之后直接用超滤透析脱盐和浓缩,省去用透析袋透析的过程.这只是我个人的想法,还望高人指点下啊,这个方法是否合理啊? [ Last edited by daidai0124 on 2009-4-14 at 13:12 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
286求调剂
已经有9人回复
-
一志愿南昌大学324求调剂
已经有6人回复
-
0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可
已经有10人回复
-
291求调剂
已经有5人回复
-
308求调剂
已经有7人回复
-
085404求调剂，总分309，本科经历较为丰富
已经有4人回复
-
压国家一区线，求导师收留，有恩必谢！
已经有3人回复
-
一志愿中南大学化学0703总分337求调剂
已经有4人回复
-
083000学硕274求调剂
已经有6人回复
-
304求调剂
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
zhaocy8903
木虫 (知名作家)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 3822.5
- 散金: 1238
- 红花: 17
- 帖子: 5798
- 在线: 1468.5小时
- 虫号: 636507
- 注册: 2008-10-25
- 专业: 微生物遗传育种学
11楼2009-04-14 13:14:14
wordsworth3180
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3624.4
- 帖子: 703
- 在线: 337.8小时
- 虫号: 568607
- 注册: 2008-06-03
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2009-04-11 11:11:27
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- BioEPI: 14
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
超滤能否脱盐和浓缩一步完成回复
★ ★ ★ ★
daidai0124(金币+4,VIP+0):谢谢,讲的很具体,本人以后就是准备大规模的提取酶,也觉得硫酸铵沉沉太浪费,不知还有什么好方法不? 4-12 08:49
daidai0124(金币+4,VIP+0):谢谢,讲的很具体,本人以后就是准备大规模的提取酶,也觉得硫酸铵沉沉太浪费,不知还有什么好方法不? 4-12 08:49
|
本人主要是从发酵液中提取酶,文献上一般的步骤是先用硫酸铵沉淀,然后透析,再用超滤浓缩,最后冷冻干燥, 但从超滤原理上看只要选好合适的超滤膜也应该可以直接脱盐,也就是硫酸铵沉淀之后直接用超滤透析脱盐和浓缩,省去用透析袋透析的过程.这只是我个人的想法,还望高人指点下啊,这个方法是否合理啊? 这要看你需要做多大的体积了。  (1)硫酸铵沉淀法：我的观点是，如果你1000 mL的发酵液的话，硫酸铵沉淀可以用，但是这浪费多少硫酸铵啊？！做学术研究可以，如果你的课题是计划做提取酶的工艺和中试的话，这种硫酸铵沉淀并不有太大的实用性。 （2）超滤步骤的选用要看你的酶溶液有多大的体积。 如果发酵液的酶的量并不是很浓的话，例如50 mL 10 mg/L的酶量，用这种超滤膜会损失掉大部分你的目地酶，都粘到膜上去了，很难洗下来（稀的NaOH可以）。不能轻信某品牌销售说的话，用用就知道了。如果你的浓缩液体积比较大，例如100-500 mL，酶的浓度也很高，这是可以用超滤膜的。 （3）对于小体积的脱盐透析，透析袋很好用的。这里是指10 mL-100 mL。从操作方便性上看，这个在小型试验中我最喜欢用。好简单啊。。。。 （4）透析袋透析完后，你想进一步浓缩酶的话，建议LZ用离子交换法。选择合适的挂柱缓冲液可一次性处理50-500 mL，选择一次性洗脱可浓缩到2-10 mL。 |
4楼2009-04-11 18:58:13
daidai0124
木虫 (正式写手)
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 2531.2
- 散金: 69
- 红花: 14
- 帖子: 981
- 在线: 593.2小时
- 虫号: 427854
- 注册: 2007-07-29
- 性别: GG
- 专业: 天然有机化学
5楼2009-04-13 19:05:16
