应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 点饱和突变
41/1返回列表
查看: 5581  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

HHHH0099

银虫 (小有名气)

[求助] 点饱和突变

有没有用SOE PCR做过点饱和突变的？
1. 用SOE PCR做点饱和突变，一般设计什么样的简并引物？NDT?NNK?
比如上游引物5'→3‘是ATGCNNKATGC，下游引物是什么？
NNK,NDT用什么去对？去互补？
2. 用SOE PCR做点饱和突变，一般构建步骤往后都是什么？还用做提质粒，双酶切鉴定，PCR鉴定么？
还是直接转表达菌看表达？然后送去测序？
专业大神求指导 。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-09-21 14:42:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白话八股

金虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-09-22 10:28:44
toyobo突变试剂盒，或者任意一家的无缝克隆试剂盒都行。突变位点设置在一条引物上

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
最爱的那个人会出现在身边。
2楼2018-09-21 15:57:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HHHH0099

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 白话八股 at 2018-09-21 15:57:01
toyobo突变试剂盒，或者任意一家的无缝克隆试剂盒都行。突变位点设置在一条引物上

能稍微说的详细点么？引物不需要设计两条链么？我想问NDT的互补链上互补碱基是什么？
赞一下 回复此楼
3楼2018-09-25 08:55:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白话八股

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by HHHH0099 at 2018-09-25 08:55:50
能稍微说的详细点么？引物不需要设计两条链么？我想问NDT的互补链上互补碱基是什么？...

引物两条链，我一般把突变点设计在一条引物上

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
最爱的那个人会出现在身边。
4楼2018-09-25 17:13:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 HHHH0099 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +19 Lanmanbaby 2026-08-09 32/1600 2026-08-12 09:56 by gltch
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭