应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 点饱和突变
41/1返回列表
查看: 5615  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

HHHH0099

银虫 (小有名气)

[求助] 点饱和突变

有没有用SOE PCR做过点饱和突变的？
1. 用SOE PCR做点饱和突变，一般设计什么样的简并引物？NDT?NNK?
比如上游引物5'→3‘是ATGCNNKATGC，下游引物是什么？
NNK,NDT用什么去对？去互补？
2. 用SOE PCR做点饱和突变，一般构建步骤往后都是什么？还用做提质粒，双酶切鉴定，PCR鉴定么？
还是直接转表达菌看表达？然后送去测序？
专业大神求指导 。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-09-21 14:42:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白话八股

金虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-09-22 10:28:44
toyobo突变试剂盒，或者任意一家的无缝克隆试剂盒都行。突变位点设置在一条引物上

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
最爱的那个人会出现在身边。
2楼2018-09-21 15:57:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HHHH0099

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 白话八股 at 2018-09-21 15:57:01
toyobo突变试剂盒，或者任意一家的无缝克隆试剂盒都行。突变位点设置在一条引物上

能稍微说的详细点么？引物不需要设计两条链么？我想问NDT的互补链上互补碱基是什么？
赞一下 回复此楼
3楼2018-09-25 08:55:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白话八股

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by HHHH0099 at 2018-09-25 08:55:50
能稍微说的详细点么？引物不需要设计两条链么？我想问NDT的互补链上互补碱基是什么？...

引物两条链，我一般把突变点设计在一条引物上

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
最爱的那个人会出现在身边。
4楼2018-09-25 17:13:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 HHHH0099 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭