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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 重组蛋白表达，离心后在上清还是沉淀
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四叶草B-)

新虫 (初入文坛)

[求助] 重组蛋白表达，离心后在上清还是沉淀 已有2人参与

重组蛋白表达，离心以后在上清还是沉淀中是由什么而决定的，出现在两者中都正常吗？还是说默认出现在上清中是正常的？还是说要自己查目的蛋白是可溶还是包涵体形式存在。
总之，基因后目的蛋白出现在上清或沉淀中到底说明了哪些问题呢？

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1楼 2018-09-20 23:25:52
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个时候将你的上清和沉淀都跑个胶，再结合你的目的蛋白条带大小判断是上清还是沉淀
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2楼2018-09-21 09:01:52
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bio转录组

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
渊博震天: 金币+5, 鼓励有价值的回帖 2018-09-21 14:44:15
首先出现在在什么位置，有这个蛋白的属性决定，还有部分原因就是诱导条件，理论上出现在哪儿都正常，只不过出现在包涵体需要纯化复性，否则得到的蛋白没活性。出现在上清可以直接纯化就行，相对简单一些。
检验标准就是超声破碎，然后离心，跑胶检测。
可以根据文献，确认一下其他物种这个基因在哪儿表达做一个参考，一般蛋白越大，包涵体的可能性越大。
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生活活生生累死
3楼2018-09-21 12:03:23
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四叶草B-)

新虫 (初入文坛)
好的。非常感谢

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4楼2018-09-21 12:25:19
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四叶草B-)

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-09-21 09:01:52
这个时候将你的上清和沉淀都跑个胶，再结合你的目的蛋白条带大小判断是上清还是沉淀

好，谢谢你！victory:

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5楼2018-09-21 12:26:13
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四叶草B-)

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bio转录组 at 2018-09-21 12:03:23
首先出现在在什么位置，有这个蛋白的属性决定，还有部分原因就是诱导条件，理论上出现在哪儿都正常，只不过出现在包涵体需要纯化复性，否则得到的蛋白没活性。出现在上清可以直接纯化就行，相对简单一些。
检验标准 ...

好的！非常感谢，嘻嘻

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6楼2018-09-21 12:26:51
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ddtao

新虫 (小有名气)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-09-25 16:21:59
利用非病毒载体 poly(lys,r9,his)-peg-poly(lys,r9,his)

后纯化操作更方便
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7楼2019-04-04 13:44:13
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四叶草B-)

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ddtao at 2019-04-04 13:44:13
利用非病毒载体 poly(Lys,R9,His)-PEG-poly(Lys,R9,His)
http://www.drug-delivery.com/
后纯化操作更方便

好的，谢谢你

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8楼2019-04-04 14:40:05
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