24小时热门版块排行榜    

查看: 4960  |  回复: 7

四叶草B-)

新虫 (初入文坛)

[求助] 重组蛋白表达,离心后在上清还是沉淀 已有2人参与

重组蛋白表达,离心以后在上清还是沉淀中是由什么而决定的,出现在两者中都正常吗?还是说默认出现在上清中是正常的?还是说要自己查目的蛋白是可溶还是包涵体形式存在。
总之,基因后目的蛋白出现在上清或沉淀中到底说明了哪些问题呢?

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个时候将你的上清和沉淀都跑个胶,再结合你的目的蛋白条带大小判断是上清还是沉淀
2楼2018-09-21 09:01:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio转录组

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
渊博震天: 金币+5, 鼓励有价值的回帖 2018-09-21 14:44:15
首先出现在在什么位置,有这个蛋白的属性决定,还有部分原因就是诱导条件,理论上出现在哪儿都正常,只不过出现在包涵体需要纯化复性,否则得到的蛋白没活性。出现在上清可以直接纯化就行,相对简单一些。
检验标准就是超声破碎,然后离心,跑胶检测。
可以根据文献,确认一下其他物种这个基因在哪儿表达做一个参考,一般蛋白越大,包涵体的可能性越大。
生活活生生累死
3楼2018-09-21 12:03:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

四叶草B-)

新虫 (初入文坛)

4楼2018-09-21 12:25:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

四叶草B-)

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-09-21 09:01:52
这个时候将你的上清和沉淀都跑个胶,再结合你的目的蛋白条带大小判断是上清还是沉淀

好,谢谢你!victory:

发自小木虫Android客户端
5楼2018-09-21 12:26:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

四叶草B-)

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bio转录组 at 2018-09-21 12:03:23
首先出现在在什么位置,有这个蛋白的属性决定,还有部分原因就是诱导条件,理论上出现在哪儿都正常,只不过出现在包涵体需要纯化复性,否则得到的蛋白没活性。出现在上清可以直接纯化就行,相对简单一些。
检验标准 ...

好的!非常感谢,嘻嘻

发自小木虫Android客户端
6楼2018-09-21 12:26:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ddtao

新虫 (小有名气)



myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-09-25 16:21:59
利用非病毒载体 poly(lys,r9,his)-peg-poly(lys,r9,his)

后纯化操作更方便
7楼2019-04-04 13:44:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

四叶草B-)

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by ddtao at 2019-04-04 13:44:13
利用非病毒载体 poly(Lys,R9,His)-PEG-poly(Lys,R9,His)
http://www.drug-delivery.com/
后纯化操作更方便

好的,谢谢你

发自小木虫Android客户端
8楼2019-04-04 14:40:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员Jgh8z6 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +4 西山十月 2026-08-09 6/300 2026-08-10 00:16 by liufeng0619
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +7 Lanmanbaby 2026-08-09 14/700 2026-08-09 23:33 by Tide man
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +4 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-09 22:24 by otj2008
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见