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四叶草B-)

新虫 (初入文坛)

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[求助] 重组蛋白表达，离心后在上清还是沉淀已有2人参与

重组蛋白表达，离心以后在上清还是沉淀中是由什么而决定的，出现在两者中都正常吗？还是说默认出现在上清中是正常的？还是说要自己查目的蛋白是可溶还是包涵体形式存在。
总之，基因后目的蛋白出现在上清或沉淀中到底说明了哪些问题呢？

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1楼 2018-09-20 23:25:52

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金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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渊博震天: 金币+5, 鼓励有价值的回帖 2018-09-21 14:44:15

首先出现在在什么位置，有这个蛋白的属性决定，还有部分原因就是诱导条件，理论上出现在哪儿都正常，只不过出现在包涵体需要纯化复性，否则得到的蛋白没活性。出现在上清可以直接纯化就行，相对简单一些。
检验标准就是超声破碎，然后离心，跑胶检测。
可以根据文献，确认一下其他物种这个基因在哪儿表达做一个参考，一般蛋白越大，包涵体的可能性越大。