24小时热门版块排行榜    

查看: 1093  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

草哥cium

新虫 (正式写手)

[求助] 保的大肠杆菌表达不出来了 已有1人参与

我用40%左右的甘油保的bl21( de3)放在-20差不多三个多月了。。之前表达纯化都很顺利,但是最近直接拿出来摇菌就纯化表达的不好了。。。   难道是质粒丢失?。。但是在有抗性的LB里都扩增的还不错啊。。。。是不是菌放久了就会影响原核表达啊。。。还是啥原因。。该怎么办呀

@hc-material 发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

werq63

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

BL21里面有核酸酶,长期保存可能会导致质粒丢失,可以划线复苏一下然后再提取质粒,鉴定质粒正确之后再转化到BL21,以后以质粒的形式保存,DH5a提取的质粒
7楼2018-09-25 09:39:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

2楼2018-09-19 23:08:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jack_Willan

木虫 (小有名气)

应该放-80  不过表达不出来我也不懂

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-09-19 23:18:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿门阿前1991

金虫 (小有名气)

大肠杆菌一般用15%,20%甘油保存
总会出现一个温柔的人,让你变得温暖,然后默默离开。
4楼2018-09-20 08:13:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见