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qm66

新虫 (小有名气)


已领完
引物二聚体
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跑胶有目标条带和引物二聚体,怎么减少引物二聚体,修改pcr体系,减少引物的量,目标条带也变浅了,增加cDNA的量,目标条带和引物二聚体都变亮。

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Jack_Willan

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没有其他杂带也能用吧  也可以重新重新设计引物

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7楼2018-09-16 17:08:17
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534720018

至尊木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般只要目标条带够亮,能与杂带分开就行吧

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8楼2018-09-16 21:23:15
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海风_Spume

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以看看你的二聚体是怎么产生的,根据我最近的发现,二聚体可能是被高保真酶剪切引物产生的,可以先分析下引物二级结果,如果是可以修饰引物

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9楼2018-09-17 10:41:39
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海风_Spume

新虫 (小有名气)


引用回帖:
9楼: Originally posted by 海风_Spume at 2018-09-17 10:41:39
可以看看你的二聚体是怎么产生的,根据我最近的发现,二聚体可能是被高保真酶剪切引物产生的,可以先分析下引物二级结果,如果是可以修饰引物

结构

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10楼2018-09-17 10:42:05
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qm66

新虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by Jack_Willan at 2018-09-16 17:08:17
没有其他杂带也能用吧  也可以重新重新设计引物

目标条带比引物二聚体还浅,用的是cDNA扩增,提取的RNA在18S和5S中间有杂带,28S在DNAmarker2000那边,请问这RNA可用吗?

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11楼2018-09-17 13:24:33
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4d88843212楼
2018-09-16 14:39   回复  
qm66(金币+1): 谢谢参与
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2018-09-16 14:39   回复  
qm66(金币+1): 谢谢参与
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wj03009864楼
2018-09-16 14:41   回复  
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2018-09-16 14:41   回复  
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8b39258586楼
2018-09-16 14:42   回复  
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