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嘟嘟熊levi金虫 (小有名气)
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反相HPLC分离天然多肽 已有3人参与
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各位老师，最近实验从天然中药材中分离小分子多肽。 粉碎药材后，PBS浸泡，离心取上清，3000Da透析袋透析，收集小分子多肽。分子排阻色谱分离，收集洗脱峰，进行HPLC分离鉴定。 采用梯度洗脱，A：水；B：含有0.1%TFA的乙腈。0 min，A：99%，B：1%；25 min，A：95%，B：5%；32 min；A：85%，B：15%。 问题是不加TFA没有多肽峰，加了0.1%TFA，基线不稳。整个实验中HPLC的重复性很差。请问各位老师，有什么好方法吗？不胜感激。 |
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