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浸花法转化拟南芥的问题 已有2人参与
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浸花法转化拟南芥的时候需要添加乙酰丁香酮嘛，具体的浓度是多少，什么时候添加，是摇菌的时候还是侵染液里添加 发自小木虫Android客户端 |
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starseacow
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2楼2018-08-16 07:28:47
【答案】应助回帖
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菌液准备 (1). 培养菌液至OD600达 0.8－1.5； (2). 制备重悬渗透培养液（1L）：1/2MS，50g蔗糖，0.5g MES，500μl Silwet L-77, PH 5.7。； (3). 离心，5000rpm，15min，收集菌体，弃上清，并倒置在消过毒的纸巾上，用5ml 重悬渗透培养液重悬，然后加上剩余的悬浮液，使OD600至1.0－1.5。 转化 将上述农杆菌菌液倒在小烧杯里，静置1h后，将长有拟南芥的培养皿倒扣于其上，保证莲座以上部分浸没于菌液上，2－3min以后取出来，侧置于托盘上，并覆盖保鲜膜以保持湿度，第二天将其直立，仍覆盖保鲜膜3－4天，可以根据情况在培养3－4天或者一周后，再侵染一次，待种子成熟以后，收获种子。 |
3楼2018-08-25 17:34:19