应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR问题
51/1返回列表
查看: 401  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

whlz630

金虫 (正式写手)

[交流] PCR问题

PCR三个泳道使用的是同一对引物，来源于三个不同的菌落质粒模板，循环数是32，有的泳道背景很模糊，是什么原因？
是不是模板降解，还是其他原因？
PCR条带图如下：
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-04-02 12:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whlz630

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 小猫三两只 at 2009-4-2 12:38:
你模板是多大

杂带很多,会不会是DNA污染

另外改变一下退火温度试试看

你指的DNA污染是什么意思啊？
退火温度是59度
赞一下 回复此楼
4楼2009-04-02 12:56:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

小猫三两只

金虫 (正式写手)
★
350784478(金币+1):谢谢参与
你模板是多大

杂带很多,会不会是DNA污染

另外改变一下退火温度试试看
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-04-02 12:38:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whlz630

金虫 (正式写手)
模板是大肠杆菌质粒
模板浓度是200ng/微升
PCR体系是25微升，模板使用量是1微升
赞一下 回复此楼
3楼2009-04-02 12:55:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
原因如下：
1模板降解有可能，但是可能性很小，可以试着调整一下模板的浓度和纯度
2弥散条带，通常都是引物和模板错配或者不配引起的，用保真性高一点的酶或者检查一下引物
3引物浓度大小也有可能引起弥散
赞一下 回复此楼
会当凌绝顶，一览众山小
5楼2009-04-02 21:38:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研复试调剂，过国家线的同学都可报名 +4 黑！在干嘛 2026-02-28 5/250 2026-03-02 16:48 by chock1337
[考研] 295求调剂。一志愿报考郑州大学化学工艺学硕，总分295分 +5 yl1 2026-03-02 5/250 2026-03-02 15:24 by sucesssucess
[考研] 303求调剂 +5 今夏不夏 2026-03-01 5/250 2026-03-02 15:01 by 向上的胖东
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +4 Qwertyuop 2026-03-01 4/200 2026-03-02 14:27 by 升格阿达
[考研] 282求调剂 +4 2103240126 2026-03-02 5/250 2026-03-02 13:45 by littlehu66
[考研] 材料与化工328求调剂 +3 。，。，。，。i 2026-03-02 3/150 2026-03-02 13:09 by houyaoxu
[基金申请] 成果系统访问量大，请15分钟后再尝试。由此给您造成的不便，敬请谅解。 +5 xhuama 2026-03-02 5/250 2026-03-02 12:34 by stidwellNK
[考研] 268求调剂 +4 简单点0 2026-03-02 5/250 2026-03-02 11:54 by ms629
[考研] 295求调剂 +8 19171856320 2026-02-28 8/400 2026-03-02 11:19 by yuchj
[考研] 材料工程专硕283求调剂 5+4 ，！？ 2026-03-02 6/300 2026-03-02 11:07 by 黑！在干嘛
[考研] 264求调剂 +4 巴拉巴拉根556 2026-02-28 4/200 2026-03-02 10:48 by yuchj
[考研] 275求调剂 +3 L-xin? 2026-03-01 6/300 2026-03-02 10:22 by 热情沙漠
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭