应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR问题
51/1返回列表
查看: 402  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

whlz630

金虫 (正式写手)

[交流] PCR问题

PCR三个泳道使用的是同一对引物，来源于三个不同的菌落质粒模板，循环数是32，有的泳道背景很模糊，是什么原因？
是不是模板降解，还是其他原因？
PCR条带图如下：
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-04-02 12:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whlz630

金虫 (正式写手)
模板是大肠杆菌质粒
模板浓度是200ng/微升
PCR体系是25微升，模板使用量是1微升
赞一下 回复此楼
3楼2009-04-02 12:55:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

小猫三两只

金虫 (正式写手)
★
350784478(金币+1):谢谢参与
你模板是多大

杂带很多,会不会是DNA污染

另外改变一下退火温度试试看
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-04-02 12:38:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whlz630

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 小猫三两只 at 2009-4-2 12:38:
你模板是多大

杂带很多,会不会是DNA污染

另外改变一下退火温度试试看

你指的DNA污染是什么意思啊？
退火温度是59度
赞一下 回复此楼
4楼2009-04-02 12:56:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
原因如下：
1模板降解有可能，但是可能性很小，可以试着调整一下模板的浓度和纯度
2弥散条带，通常都是引物和模板错配或者不配引起的，用保真性高一点的酶或者检查一下引物
3引物浓度大小也有可能引起弥散
赞一下 回复此楼
会当凌绝顶，一览众山小
5楼2009-04-02 21:38:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料085601调剂 +3 多多子. 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:37 by yeahyou
[考研] 环境调剂 +3 chenhanheng 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:37 by houyaoxu
[考研] 0703 总分319求调剂 +3 Xinyuu 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:20 by houyaoxu
[考研] 化工京区271求调剂 +5 11ing 2026-03-02 5/250 2026-03-02 17:16 by houyaoxu
[考研] 085600求调剂 +3 LRZZZZZZ 2026-03-02 3/150 2026-03-02 16:58 by zeng1010
[考研] 材料与化工328求调剂 +3 。，。，。，。i 2026-03-02 3/150 2026-03-02 13:09 by houyaoxu
[考研] 化工270求调剂 +8 什么名字qwq 2026-03-02 8/400 2026-03-02 13:03 by houyaoxu
[基金申请] 成果系统访问量大，请15分钟后再尝试。由此给您造成的不便，敬请谅解。 +5 xhuama 2026-03-02 5/250 2026-03-02 12:34 by stidwellNK
[考研] 材料工程274求调剂 +4 Lilithan 2026-03-01 4/200 2026-03-02 12:06 by yuchj
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 9/450 2026-03-02 12:04 by 52hz~~
[基金申请] 此成果不能导入原因：元数据必填信息不完整，可 进行补充。 +4 Kittylucky 2026-03-02 5/250 2026-03-02 11:07 by jurkat.1640
[考研] 284求调剂 +10 天下熯 2026-02-28 11/550 2026-03-02 11:03 by 无际的草原
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 7/350 2026-03-02 10:38 by lature00
[考研] 材料复试调剂 +4 学材料的点 2026-03-01 5/250 2026-03-02 08:26 by houyaoxu
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭