应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR问题
61/1返回列表
查看: 404  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

whlz630

金虫 (正式写手)

[交流] PCR问题

PCR三个泳道使用的是同一对引物，来源于三个不同的菌落质粒模板，循环数是32，有的泳道背景很模糊，是什么原因？
是不是模板降解，还是其他原因？
PCR条带图如下：
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-04-02 12:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小猫三两只

金虫 (正式写手)
★
350784478(金币+1):谢谢参与
你模板是多大

杂带很多,会不会是DNA污染

另外改变一下退火温度试试看
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-04-02 12:38:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whlz630

金虫 (正式写手)
模板是大肠杆菌质粒
模板浓度是200ng/微升
PCR体系是25微升，模板使用量是1微升
赞一下 回复此楼
3楼2009-04-02 12:55:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whlz630

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 小猫三两只 at 2009-4-2 12:38:
你模板是多大

杂带很多,会不会是DNA污染

另外改变一下退火温度试试看

你指的DNA污染是什么意思啊？
退火温度是59度
赞一下 回复此楼
4楼2009-04-02 12:56:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
原因如下：
1模板降解有可能，但是可能性很小，可以试着调整一下模板的浓度和纯度
2弥散条带，通常都是引物和模板错配或者不配引起的，用保真性高一点的酶或者检查一下引物
3引物浓度大小也有可能引起弥散
赞一下 回复此楼
会当凌绝顶，一览众山小
5楼2009-04-02 21:38:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛
提高退火温度，减少模板，增加几个循环数
赞一下 回复此楼
但愿人长久
6楼2009-04-03 08:31:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 whlz630 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 272求调剂 +9 材紫有化 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:22 by hypershenger
[考研] 理学，工学，农学调剂，少走弯路，这里欢迎您！ +4 likeihood 2026-03-02 7/350 2026-03-02 20:13 by 崔wj
[考研] 中国科学技术大学材料与化工281求调剂，有科研和获奖经历 +5 wsxw 2026-03-02 5/250 2026-03-02 20:12 by hypershenger
[考研] 材料复试调剂 +5 学材料的点 2026-03-01 6/300 2026-03-02 20:01 by hypershenger
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 3/150 2026-03-02 19:59 by hypershenger
[考研] 268求调剂 +3 好运连绵不绝 2026-03-02 3/150 2026-03-02 19:05 by zhukairuo
[考研] 295求调剂。一志愿报考郑州大学化学工艺学硕，总分295分 +7 yl1 2026-03-02 7/350 2026-03-02 19:03 by zhukairuo
[考研] 材料调剂 +3 恒顺自然 2026-03-02 3/150 2026-03-02 18:49 by L135790
[考研] 0703 总分319求调剂 +3 Xinyuu 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:20 by houyaoxu
[考研] 材料与化工328求调剂 +3 。，。，。，。i 2026-03-02 3/150 2026-03-02 13:09 by houyaoxu
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +6 ieewxg 2026-02-25 7/350 2026-03-02 12:44 by stidwellNK
[考研] 276求调剂 +4 路lyh123 2026-02-28 5/250 2026-03-02 11:20 by yuchj
[考研] 284求调剂 +10 天下熯 2026-02-28 11/550 2026-03-02 11:03 by 无际的草原
[考研] 264求调剂 +4 巴拉巴拉根556 2026-02-28 4/200 2026-03-02 10:48 by yuchj
[考研] 275求调剂 +3 L-xin? 2026-03-01 6/300 2026-03-02 10:22 by 热情沙漠
[考研] 0856材料调剂 +4 沿岸有贝壳OUC 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:19 by 公瑾逍遥
[考研] 材料工程269求调剂 +3 白刺玫 2026-03-02 3/150 2026-03-02 09:25 by 一休哥FU
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭