24小时热门版块排行榜    

查看: 450  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

04swlcm

金虫 (小有名气)


[交流] PCR问题

我今天跑的菌落PCR条带很淡在150bp左右,但是我的目的条带在1400bp左右
整整一个数量级之差,请教各位大侠主要问题处在哪里呢?
谢谢大家帮组!PCR个试剂都是本月新买的,应该没什么问题啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xutao

金虫 (著名写手)

第三军团总参谋

学习一下,最近我pcr也p不出来
第三军团
7楼2009-03-31 23:46:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

04swlcm

金虫 (小有名气)


补充

我的PCR体系是:
10*PCR  buffer :5ul
Mg2+:   3ul
dNTP(10um each):4ul
P1,P2(10um):各1.5ul
taq 酶:1ul
ddH2O:up to 50ul
挑取单菌落

才接触PCR,不知道体系有问题没?先谢谢指点
2楼2009-03-29 20:46:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mofatuzi

新虫 (小有名气)

引物二聚体,你的片段没P出来,就是那个克隆不是不要的,继续挑继续P
4楼2009-03-29 21:35:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DNA6593

新虫 (初入文坛)

我常用的PCR反应体系(25ul)

★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):鼓励新虫~ 4-1 09:14
buffer :2.5ul
Mg2+:   2ul
dNTP: 1ul
P1,P2(10um):各1ul
菌液:2ul
taq 酶:0.25ul
ddH2O:15.25ul
total: 25ul
多做两次,可能就会出来的,有的时候浓度不够,也出不了带,试试纯化后有带不。
呵呵,做实验,慢慢来,不能急的。
平凡生活
5楼2009-03-29 21:51:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +15 硕星赴 2026-03-23 15/750 2026-03-26 02:16 by BruceLiu320
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 08工学调剂 +13 用户573181 2026-03-20 18/900 2026-03-25 22:00 by zbssa
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +3 小鱼爱有机 2026-03-25 3/150 2026-03-25 20:13 by qingfeng258
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +4 小小陈小小 2026-03-22 7/350 2026-03-25 19:07 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +4 勇敢的小吴 2026-03-20 4/200 2026-03-25 18:12 by xcjcqu
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
信息提示
请填处理意见