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04swlcm

金虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 804.9
散金: 18
帖子: 118
在线: 198.5小时
虫号: 616251
注册: 2008-10-03
性别: MM
专业: 生物化学

[交流] PCR问题

我今天跑的菌落PCR条带很淡在150bp左右，但是我的目的条带在1400bp左右
整整一个数量级之差，请教各位大侠主要问题处在哪里呢？
谢谢大家帮组！PCR个试剂都是本月新买的，应该没什么问题啊？

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1楼 2009-03-29 20:31:32

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

DNA6593

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4.5
帖子: 3
在线: 15分钟
虫号: 727204
注册: 2009-03-20
性别: GG
专业: 生物学

我常用的PCR反应体系（25ul）

★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):鼓励新虫~ 4-1 09:14

buffer :2.5ul
Mg2+: 2ul
dNTP: 1ul
P1，P2(10um):各1ul
菌液：2ul
taq 酶：0.25ul
ddH2O:15.25ul
total: 25ul
多做两次，可能就会出来的，有的时候浓度不够，也出不了带，试试纯化后有带不。
呵呵，做实验，慢慢来，不能急的。