24小时热门版块排行榜

返回列表

wangbo_97

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 184.8
帖子: 44
在线: 4.8小时
虫号: 7861171
注册: 2018-02-01
专业: 生物信息学

[求助] crispr grna载体构建单酶切问题已有1人参与

请教各位前辈，我搜索很多cas9/grna载体中，插入grna多为单酶切位点
想请教几个问题
这种商品化单酶切能否保证插入效率
产生自连会造成多大影响，
连接反了只能测序筛选吗，
如何保证单酶切连接构建grna载体的效率

@biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端

回复此楼

» 猜你喜欢

伊曲莫德（Etrasimod）从“肠道免疫失控”到精准靶向干预已经有1人回复
西达本胺：创新HDAC抑制剂的抗肿瘤之路已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有207人回复
金色抗生素单硫酸卡那霉素的物化性质、制备与前景已经有0人回复
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景已经有0人回复
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析已经有0人回复
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析已经有1人回复
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展已经有0人回复
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍已经有0人回复
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner 已经有0人回复

1楼 2018-07-05 14:51:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

专家经验: +24
MolEPI: 31
应助: 599 (博士)
贵宾: 2.689
金币: 24334.9
散金: 1088
红花: 88
沙发: 2
帖子: 2327
在线: 623.1小时
虫号: 849017
注册: 2009-09-16
性别: GG
专业: 细胞信号转导
管辖: 分子生物

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

一般crispr构建sgRNA所用的酶切位点都是Type IIS restriction enzymes that recognize asymmetric DNA sequences and cleave outside of their recognition sequence，建议你仔细观察。