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wangbo_97

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[求助] crispr grna载体构建单酶切问题已有1人参与

请教各位前辈，我搜索很多cas9/grna载体中，插入grna多为单酶切位点
想请教几个问题
这种商品化单酶切能否保证插入效率
产生自连会造成多大影响，
连接反了只能测序筛选吗，
如何保证单酶切连接构建grna载体的效率

@biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端

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1楼 2018-07-05 14:51:15

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gyesang

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【答案】应助回帖

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一般crispr构建sgRNA所用的酶切位点都是Type IIS restriction enzymes that recognize asymmetric DNA sequences and cleave outside of their recognition sequence，建议你仔细观察。