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[求助]
10几个碱基杂交能不能用PAGE电泳跑出来？ 已有2人参与
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最近跑胶跑到怀疑人生了。现求助万能的虫友，我的实验如下： 两条单链分别是30和60个碱基，但是只有连续12个碱基是互补的，我想通过电泳证明他们确实杂交了。目前试过10-20%的非变性PAGE胶和琼脂糖胶了，退火后室温静置2-3小时，loading dye  都跑出来，也没有显示出杂交带。有没有小伙伴有相关经验求告知，求分享啊！ |
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张青峰
木虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
meng199102: 金币+15, ★有帮助 2018-06-27 23:19:57
感谢参与，应助指数 +1
meng199102: 金币+15, ★有帮助 2018-06-27 23:19:57
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感觉有难度，12个碱基Tm值是多少？两条链有没有二级结构？如果两条单链自身形成的二级结构Tm较高，很难形成双链。 也只能试试了，像二楼说的加Mg2+。 |
meng1991023楼2018-06-27 10:24:27
★ ★
渊博震天: 金币+2, 鼓励积极回帖交流 2018-06-27 08:39:39
渊博震天: 金币+2, 鼓励积极回帖交流 2018-06-27 08:39:39
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4℃跑胶，低电压长时间跑，胶里要加Mg离子，应该可以跑出杂交条带 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2018-06-27 08:33:22
4楼2018-06-27 23:06:18
5楼2018-06-27 23:19:36
