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HPLC梯度洗脱时压力变化大,基线不稳
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| HPLC用梯度洗脱时压力有变化,使得基线老是走不稳,这正常么?要想基线走稳应该怎么办啊? |
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jsys(金币+3,VIP+0):感谢参与,哈哈! 3-31 12:20
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走基线时基线在较长一段时间内不平稳是正常的~但在走基线之前你需要做以下几点: 1、确保流动相经过滤膜抽滤,并且超声20~30分钟,以排除流动相中的气泡; 2、色谱柱有可能在做上一次样品分析时没冲洗干净,导致此次色谱柱内压力过高,解决办法是用纯甲醇以每分钟0.5ML的流速冲柱子,洗脱。 3、走流动相之前,要尽可能排掉气管和泵中的气泡,方法应该知道吧~ 4、走基线半小时后,如果基线基本上在一定频率内波动,就说明基线已基本平稳;此时,平衡基线,进一针样品,待这一针样品走完基线差不多就平了,如果还不平,继续用纯甲醇冲柱子~ 至于两个峰不能分开,原因有很多种,一般的解决办法就是降低有机相配比或者降低流速~ 附:以上几点都是我在平时操作中遇到情况的解决办法,可能不适用于你,我的机器是安捷伦1200,你可以参考参考;还有,峰分不开的样品是什么??把几个主要参数说一下啊~ |
5楼2009-03-29 01:31:10
2楼2009-03-27 16:15:27
嘉木
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3楼2009-03-27 18:11:26
ay45
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4楼2009-03-29 01:15:08













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