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HPLC梯度洗脱时压力变化大，基线不稳
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| HPLC用梯度洗脱时压力有变化，使得基线老是走不稳，这正常么？要想基线走稳应该怎么办啊？ |
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嘉木
金虫 (正式写手)
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ay45
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jsys(金币+3,VIP+0):感谢参与，哈哈！ 3-31 12:20
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走基线时基线在较长一段时间内不平稳是正常的~但在走基线之前你需要做以下几点： 1、确保流动相经过滤膜抽滤，并且超声20~30分钟，以排除流动相中的气泡； 2、色谱柱有可能在做上一次样品分析时没冲洗干净，导致此次色谱柱内压力过高，解决办法是用纯甲醇以每分钟0.5ML的流速冲柱子，洗脱。 3、走流动相之前，要尽可能排掉气管和泵中的气泡，方法应该知道吧~ 4、走基线半小时后，如果基线基本上在一定频率内波动，就说明基线已基本平稳；此时，平衡基线，进一针样品，待这一针样品走完基线差不多就平了，如果还不平，继续用纯甲醇冲柱子~ 至于两个峰不能分开，原因有很多种，一般的解决办法就是降低有机相配比或者降低流速~ 附：以上几点都是我在平时操作中遇到情况的解决办法，可能不适用于你，我的机器是安捷伦1200，你可以参考参考；还有，峰分不开的样品是什么？？把几个主要参数说一下啊~ |
5楼2009-03-29 01:31:10
