应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » p基因全长3’嘤嘤嘤
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 783  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

342667457

新虫 (小有名气)

[交流] p基因全长3’嘤嘤嘤 已有1人参与

研一小白p基因全长，est出了，3撇送测序回来有poly 结构但是blast 不是自己的基因。哭哭哭哭……设计引物的时候能用的不多，都不好用可怎么办，挑菌的时候我是不是要挑好多好多……

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-05-31 10:56:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

342667457

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2018-05-31 16:36:18
RACE实验确实还是比较考验人的一个，难度系数按说并不是很高，也有质量很高的试剂盒可以购买。但是真正做了才能感受到这个实验的难度，其实最主要的几个问题：1，跟你做的基因有太大的关系，有的基因很容易得到结果 ...

导师让做的两个基因都还没出3’    希望至少有一个能p出来吧，本来收到测序心情低落，收到大神细心的回复又有了信心

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2018-05-31 16:54:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

用户晓晓

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1，扩出来不是自己的基因说明你的引物特异性不行，那这样的话你的race条带应该也不是单一的，那就需要把另外的一些你认为是杂带的条带同样测序，可能里面有你需要的。
2，如果该基因不好设计引物的话，那你就利用基因组序列强行延长3‘端序列当做参考序列，然后设计引物利用cDNA进行扩增，碰运气，看看能不能延长3端序列，然后重新再确定的序列基础上再设计引物，看看是否可以避开非特异扩增。
3，大手笔，直接上三代全长转录组，测通该基因的所有全长转录本。

4，要是实在不行~~~兄弟，换课题吧~~~

祝试验顺利！
赞一下 回复此楼
2楼2018-05-31 11:24:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

342667457

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2018-05-31 11:24:41
1，扩出来不是自己的基因说明你的引物特异性不行，那这样的话你的race条带应该也不是单一的，那就需要把另外的一些你认为是杂带的条带同样测序，可能里面有你需要的。
2，如果该基因不好设计引物的话，那你就利用基 ...

确实有杂带呢~我下次跑胶注意一下其他的带，谢谢大神第一次发帖，收到了这么全面的回复，感动

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2018-05-31 15:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

用户晓晓

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 342667457 at 2018-05-31 19:20:43
确实有杂带呢~我下次跑胶注意一下其他的带，谢谢大神第一次发帖，收到了这么全面的回复，感动
...

RACE实验确实还是比较考验人的一个，难度系数按说并不是很高，也有质量很高的试剂盒可以购买。但是真正做了才能感受到这个实验的难度，其实最主要的几个问题：1，跟你做的基因有太大的关系，有的基因很容易得到结果，有的基因累到死都做不出来。2，转录本比较复杂的基因也会影响 3，不好判断未知片段的长度，有可能非常大，扩不全，也有可能很短，捕捉不到条带。

但是其实3端应该是比较简单的，因为有一般有polyA。而真正困难的是5端扩增。
赞一下 回复此楼
4楼2018-05-31 16:36:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279求调剂 +6 j的立方 2026-03-29 6/300 2026-03-30 11:46 by 松花缸1201
[考研] 310求调剂 +9 争取九点睡 2026-03-30 9/450 2026-03-30 11:44 by Wang200018
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +5 王一一依依 2026-03-30 7/350 2026-03-30 10:44 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研经历 +8 cccchenso 2026-03-29 8/400 2026-03-29 23:53 by 我是小康
[考研] 085600，材料与化工321分求调剂 +10 大馋小子 2026-03-28 10/500 2026-03-29 23:35 by 飞行日记西
[考研] 290求调剂 +3 dfffsar 2026-03-29 3/150 2026-03-29 22:38 by 毛毛毛阿莫2
[考研] 求调剂 +4 QiMing7 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:10 by 唐沐儿
[考研] 329求调剂 +10 钮恩雪 2026-03-25 10/500 2026-03-29 13:32 by peike
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +14 zhubinhao 2026-03-27 14/700 2026-03-29 10:01 by Sjndkwm
[考研] 332求调剂 +4 @MZB382400 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:02 by 唐沐儿
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 一志愿吉大071010，316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭