应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » p基因全长3’嘤嘤嘤
51/1返回列表
查看: 772  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

342667457

新虫 (小有名气)

[交流] p基因全长3’嘤嘤嘤 已有1人参与

研一小白p基因全长，est出了，3撇送测序回来有poly 结构但是blast 不是自己的基因。哭哭哭哭……设计引物的时候能用的不多，都不好用可怎么办，挑菌的时候我是不是要挑好多好多……

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-05-31 10:56:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

用户晓晓

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1，扩出来不是自己的基因说明你的引物特异性不行，那这样的话你的race条带应该也不是单一的，那就需要把另外的一些你认为是杂带的条带同样测序，可能里面有你需要的。
2，如果该基因不好设计引物的话，那你就利用基因组序列强行延长3‘端序列当做参考序列，然后设计引物利用cDNA进行扩增，碰运气，看看能不能延长3端序列，然后重新再确定的序列基础上再设计引物，看看是否可以避开非特异扩增。
3，大手笔，直接上三代全长转录组，测通该基因的所有全长转录本。

4，要是实在不行~~~兄弟，换课题吧~~~

祝试验顺利！
赞一下 回复此楼
2楼2018-05-31 11:24:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

342667457

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2018-05-31 11:24:41
1，扩出来不是自己的基因说明你的引物特异性不行，那这样的话你的race条带应该也不是单一的，那就需要把另外的一些你认为是杂带的条带同样测序，可能里面有你需要的。
2，如果该基因不好设计引物的话，那你就利用基 ...

确实有杂带呢~我下次跑胶注意一下其他的带，谢谢大神第一次发帖，收到了这么全面的回复，感动

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2018-05-31 15:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

用户晓晓

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 342667457 at 2018-05-31 19:20:43
确实有杂带呢~我下次跑胶注意一下其他的带，谢谢大神第一次发帖，收到了这么全面的回复，感动
...

RACE实验确实还是比较考验人的一个，难度系数按说并不是很高，也有质量很高的试剂盒可以购买。但是真正做了才能感受到这个实验的难度，其实最主要的几个问题：1，跟你做的基因有太大的关系，有的基因很容易得到结果，有的基因累到死都做不出来。2，转录本比较复杂的基因也会影响 3，不好判断未知片段的长度，有可能非常大，扩不全，也有可能很短，捕捉不到条带。

但是其实3端应该是比较简单的，因为有一般有polyA。而真正困难的是5端扩增。
赞一下 回复此楼
4楼2018-05-31 16:36:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

342667457

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2018-05-31 16:36:18
RACE实验确实还是比较考验人的一个，难度系数按说并不是很高，也有质量很高的试剂盒可以购买。但是真正做了才能感受到这个实验的难度，其实最主要的几个问题：1，跟你做的基因有太大的关系，有的基因很容易得到结果 ...

导师让做的两个基因都还没出3’    希望至少有一个能p出来吧，本来收到测序心情低落，收到大神细心的回复又有了信心

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2018-05-31 16:54:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 342667457 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 材料专硕英一数二306 +8 z1z2z3879 2026-03-18 8/400 2026-03-23 20:49 by baobaoye
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大，求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭