24小时热门版块排行榜    

查看: 1256  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

峰子大牛

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白电泳结束之后没有任何条带 已有1人参与

做完蛋白电泳之后,除了marker显示正常,剩下的完全空白,不仅没有发现目标蛋白,别的任何蛋白都没有发现。
步骤是在处理样品的时候,1ml菌液,6000r离心10min,洗涤两次,还是1ml磷酸缓冲液重悬,超声波破碎彻底之后离心,取上清20ul加5ul  5xbuffer  上样。
我想知道是因为蛋白浓度太低太低了吗还是什么原因。

@hc-material 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

峰子大牛

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-05-23 08:40:59
蛋白浓度太低了,我一般情况1ml菌液加100ul裂解液裂解或者直接加100ul1xloading buffer煮10分钟离心上样

谢谢

发自小木虫Android客户端
5楼2018-05-23 14:11:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1ml菌液离心完能看到菌体么。建议直接把1ml菌液煮一下,然后取一点电泳。换个染色液试试。
2楼2018-05-23 08:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

蛋白浓度太低了,我一般情况1ml菌液加100ul裂解液裂解或者直接加100ul1xloading buffer煮10分钟离心上样

发自小木虫Android客户端
3楼2018-05-23 08:40:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

峰子大牛

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2018-05-23 08:18:13
1ml菌液离心完能看到菌体么。建议直接把1ml菌液煮一下,然后取一点电泳。换个染色液试试。

我收集10ml的菌液,重悬用1ml 的缓冲液,这样去超声波破碎,但是感觉始终破碎不了

发自小木虫Android客户端
4楼2018-05-23 13:56:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +4 柳溪边 2026-03-26 4/200 2026-03-26 21:14 by XPU李庆
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕,求调剂 +3 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:35 by 求调剂zz
[考研] 352求调剂 +4 大米饭! 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +4 SYA! 2026-03-23 4/200 2026-03-26 15:27 by caiaijun80
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见