24小时热门版块排行榜    

查看: 1246  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

峰子大牛

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白电泳结束之后没有任何条带 已有1人参与

做完蛋白电泳之后,除了marker显示正常,剩下的完全空白,不仅没有发现目标蛋白,别的任何蛋白都没有发现。
步骤是在处理样品的时候,1ml菌液,6000r离心10min,洗涤两次,还是1ml磷酸缓冲液重悬,超声波破碎彻底之后离心,取上清20ul加5ul  5xbuffer  上样。
我想知道是因为蛋白浓度太低太低了吗还是什么原因。

@hc-material 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

蛋白浓度太低了,我一般情况1ml菌液加100ul裂解液裂解或者直接加100ul1xloading buffer煮10分钟离心上样

发自小木虫Android客户端
3楼2018-05-23 08:40:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1ml菌液离心完能看到菌体么。建议直接把1ml菌液煮一下,然后取一点电泳。换个染色液试试。
2楼2018-05-23 08:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

峰子大牛

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2018-05-23 08:18:13
1ml菌液离心完能看到菌体么。建议直接把1ml菌液煮一下,然后取一点电泳。换个染色液试试。

我收集10ml的菌液,重悬用1ml 的缓冲液,这样去超声波破碎,但是感觉始终破碎不了

发自小木虫Android客户端
4楼2018-05-23 13:56:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

峰子大牛

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-05-23 08:40:59
蛋白浓度太低了,我一般情况1ml菌液加100ul裂解液裂解或者直接加100ul1xloading buffer煮10分钟离心上样

谢谢

发自小木虫Android客户端
5楼2018-05-23 14:11:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +3 章小鱼567 2026-03-23 3/150 2026-03-24 20:25 by 汪!?!
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 7/350 2026-03-24 15:24 by cuifj
[考研] 293求调剂 +6 加一一九 2026-03-24 6/300 2026-03-24 14:29 by JourneyLucky
[考研] 305分求调剂(食品工程) +5 Sxy112 2026-03-21 7/350 2026-03-24 12:27 by 544594351
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
请填处理意见