24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1258  |  回复: 6

峰子大牛

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白电泳结束之后没有任何条带 已有1人参与

做完蛋白电泳之后,除了marker显示正常,剩下的完全空白,不仅没有发现目标蛋白,别的任何蛋白都没有发现。
步骤是在处理样品的时候,1ml菌液,6000r离心10min,洗涤两次,还是1ml磷酸缓冲液重悬,超声波破碎彻底之后离心,取上清20ul加5ul  5xbuffer  上样。
我想知道是因为蛋白浓度太低太低了吗还是什么原因。

@hc-material 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1ml菌液离心完能看到菌体么。建议直接把1ml菌液煮一下,然后取一点电泳。换个染色液试试。
2楼2018-05-23 08:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

蛋白浓度太低了,我一般情况1ml菌液加100ul裂解液裂解或者直接加100ul1xloading buffer煮10分钟离心上样

发自小木虫Android客户端
3楼2018-05-23 08:40:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

峰子大牛

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2018-05-23 08:18:13
1ml菌液离心完能看到菌体么。建议直接把1ml菌液煮一下,然后取一点电泳。换个染色液试试。

我收集10ml的菌液,重悬用1ml 的缓冲液,这样去超声波破碎,但是感觉始终破碎不了

发自小木虫Android客户端
4楼2018-05-23 13:56:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

峰子大牛

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-05-23 08:40:59
蛋白浓度太低了,我一般情况1ml菌液加100ul裂解液裂解或者直接加100ul1xloading buffer煮10分钟离心上样

谢谢

发自小木虫Android客户端
5楼2018-05-23 14:11:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

10ml量应该够了,你可以加点溶菌酶,反复冻融3-4次后再去超声,效果应该不错。

发自小木虫Android客户端
6楼2018-05-23 16:34:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

峰子大牛

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-05-23 16:34:24
10ml量应该够了,你可以加点溶菌酶,反复冻融3-4次后再去超声,效果应该不错。

嗯嗯 好的 谢谢你

发自小木虫Android客户端
7楼2018-05-23 21:50:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员SaBshS 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 348求调剂 +3 小懒虫不懒了 2026-03-27 3/150 2026-03-27 04:30 by wxiongid
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 08工学调剂 +13 用户573181 2026-03-20 20/1000 2026-03-26 21:22 by 用户573181
[考研] 324求调剂 +3 hanamiko 2026-03-26 3/150 2026-03-26 21:00 by sanrepian
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +7 丹青奶盖 2026-03-26 7/350 2026-03-26 19:18 by macy2011
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 279 分 求调剂 +3 睡个好觉_16 2026-03-24 3/150 2026-03-26 15:43 by zzll406
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见