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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » PCR产物连入18T载体有固定位置吗？
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强壮的小软

新虫 (小有名气)

[求助] PCR产物连入18T载体有固定位置吗？ 已有2人参与

一般PCR产物连上质粒后转化后，抽提质粒后酶切然后测序。其中酶切位点是怎么找的，是设计在引物上的还是在质粒上找的。如果在质粒上找的，是不是PCR产物连在质粒上位置是固定的。我是小白，有没有大神科普一下

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1楼 2018-05-16 22:41:26
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强壮的小软

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2018-05-16 22:58:55
在质粒上找合适的酶切位点，注意PCR产物中不能同时出现该酶切位点。位置是不是固定的不是很清楚的意思，你选好了酶切位点，那产物就肯定插入在你选择的两个酶切位点中啊。

祝试验顺利！

我看别人文献里面双酶切，他是怎么确定产物就在中间的，所以我就想是不是PCR连在18T载体上有固定位置。谢谢你的回答！

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3楼2018-05-16 23:03:12
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用户晓晓

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-05-17 07:53:07
在质粒上找合适的酶切位点，注意PCR产物中不能同时出现该酶切位点。位置是不是固定的不是很清楚的意思，你选好了酶切位点，那产物就肯定插入在你选择的两个酶切位点中啊。

祝试验顺利！
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2楼2018-05-16 22:58:55
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心死后死心

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果是TAKARA的18-T载体 ,他的克隆位点是确定的，你可以下载他的说明书看看
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4楼2018-05-21 21:21:30
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