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强壮的小软

新虫 (小有名气)

[求助] PCR产物连入18T载体有固定位置吗? 已有2人参与

一般PCR产物连上质粒后转化后,抽提质粒后酶切然后测序。其中酶切位点是怎么找的,是设计在引物上的还是在质粒上找的。如果在质粒上找的,是不是PCR产物连在质粒上位置是固定的。我是小白,有没有大神科普一下

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用户晓晓

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-05-17 07:53:07
在质粒上找合适的酶切位点,注意PCR产物中不能同时出现该酶切位点。位置是不是固定的不是很清楚的意思,你选好了酶切位点,那产物就肯定插入在你选择的两个酶切位点中啊。

祝试验顺利!
2楼2018-05-16 22:58:55
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强壮的小软

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2018-05-16 22:58:55
在质粒上找合适的酶切位点,注意PCR产物中不能同时出现该酶切位点。位置是不是固定的不是很清楚的意思,你选好了酶切位点,那产物就肯定插入在你选择的两个酶切位点中啊。

祝试验顺利!

我看别人文献里面双酶切,他是怎么确定产物就在中间的,所以我就想是不是PCR连在18T载体上有固定位置。谢谢你的回答!

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3楼2018-05-16 23:03:12
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心死后死心

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果是TAKARA的18-T载体 ,他的克隆位点是确定的,你可以下载他的说明书看看
4楼2018-05-21 21:21:30
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