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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » N/P比怎么求？非常感谢
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monster_zeh

金虫 (小有名气)

[求助] N/P比怎么求？非常感谢 已有1人参与

我做的是PEI和壳聚糖包载siRNA。
以下是我的N/P比计算过程，算出来之后发现siRNA的用量好多啊。。是不是哪里有问题？跪求大家耐心看一下。

纳米粒制备：20mg壳聚糖（分子量6万，脱乙酰度82%），壳聚糖每个单元Mw=177，分子量60000，即有339个单元，每mol壳聚糖有339*82%=278mol的氨基。20 mg壳聚糖的摩尔量是0.02/60000=3*10^-7mol，N的摩尔量即为3*10^-7mol*278=9*10^-5mol。
5mg PEI（分子量10000），每43分子量对应一个N，即每molPEI有233mol的N。5mg PEI的摩尔量是0.005/10000=5*10^-7mol，N的摩尔量是5*10^-7mol*233=1*10^-4mol。
因此纳米粒中N的摩尔量是9*10^-5mol+1*10^-4mol=2*10^-4mol (20 0000 nmol)。

siRNA有42个碱基，即每mol siRNA有42mol的P。网上订购2OD的siRNA为5 nmol，共有42*5nmol=210 nmol的P。

综上所述，假设N/P比是50/1, 那么需要的P是20 0000 nmol/50=4000 nmol。我在网上订购的2OD siRNA远远不够用，这个实验就是这么费钱还是我的计算有问题啊

非常感谢大家！！！！！！！！！！！！！！！
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1楼 2018-05-08 16:00:18
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monster_zeh

金虫 (小有名气)
不能沉啊 在线等挺急的
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2楼2018-05-09 10:14:36
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wsn1992525

木虫 (小有名气)
你的计算没有问题。问题在于做实验的时候不需要几十mg的材料，细胞实验的话每组只需要大概几十ug左右。你缩小一千倍一管siRNA能用好几个板了。

发自小木虫IOS客户端
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3楼2018-05-09 17:28:13
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monster_zeh

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wsn1992525 at 2018-05-09 17:28:13
你的计算没有问题。问题在于做实验的时候不需要几十mg的材料，细胞实验的话每组只需要大概几十ug左右。你缩小一千倍一管siRNA能用好几个板了。

多谢！你没应助 没法给你金币啊
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4楼2018-05-14 09:23:15
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monster_zeh

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wsn1992525 at 2018-05-09 17:28:13
你的计算没有问题。问题在于做实验的时候不需要几十mg的材料，细胞实验的话每组只需要大概几十ug左右。你缩小一千倍一管siRNA能用好几个板了。

请问订购siRNA的时候一般订购多少OD？用来做完结构表征、细胞、动物这一整套实验。
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5楼2018-05-15 14:44:36
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changguidong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
monster_zeh: 金币+20, ★★★很有帮助 2018-06-01 08:23:41
引用回帖:
5楼: Originally posted by monster_zeh at 2018-05-15 14:44:36
请问订购siRNA的时候一般订购多少OD？用来做完结构表征、细胞、动物这一整套实验。...

一般电镜观察，常规细胞实验6孔板3-4块，通常2OD就够了，动物实验看具体给药方式，如果全身按照1-10mg/kg。
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6楼2018-05-31 11:14:30
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changguidong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般电镜观察，常规细胞实验6孔板3-4块，通常2OD就够了，动物实验看具体给药方式，如果全身按照1-10mg/kg。
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7楼2018-05-31 11:14:49
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abab?

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wsn1992525 at 2018-05-09 17:28:13
你的计算没有问题。问题在于做实验的时候不需要几十mg的材料，细胞实验的话每组只需要大概几十ug左右。你缩小一千倍一管siRNA能用好几个板了。

你好，那如果要拿去马尔文粒径仪那里测电位和粒径呢？感觉是不是也需要用很多的siRNA？需要在样品池里加入0.8-1.0mL左右的溶液。
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8楼2023-02-24 10:30:59
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