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请教！荧光定量PCR测的两个基因，用的一个内参，能不能比较这两个基因表达量的差异 已有1人参与
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| 请教！荧光定量PCR同时测了两个基因，用的一个内参，能不能比较这两个基因表达量的差异？？？ |
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2楼2018-04-24 12:49:18
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2018-04-27 07:57:14
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2018-04-27 07:57:14
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不能。相对定量怎么计算我就不多说了，我们用了Ct值和2，Ct值的是达到设定的荧光阈值所需的循环数，它与初始模板数有关，2就是理想的指数递增，但是 Ct值真的只与初始模板数有关吗？如果换一条引物呢，那就不一定可吧。可见如果我们用不同的引物，那么比较两个基因的表达量得到的结果可能还不一样。为什么？不同引物pcr的长度不同，每个循环积累的荧光强度也不同，如果你的荧光引物每一轮pcr的长度很长，那么也减小Ct值，那么引物pcr的长度和应该强度呈现正比，我们可以根据这个进行基因全长换算吗？没有看到过相关的参考文献，应该荧光定量pcr的两种数据处理，相对定量走不通，所以你只能选择绝对定量 发自小木虫Android客户端 |
3楼2018-04-27 03:01:47