应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » sds page求解决跑胶问题，希望能跑的美观
51/1返回列表
查看: 1693  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Karida_14

新虫 (小有名气)

[求助] sds page求解决跑胶问题，希望能跑的美观 已有2人参与

我想问sds-page的loading buffer的用量如何来确定，怎么样才能跑出清晰好看的条带，包括上样量一般经验值加多少？我跑胶的泳道有的一条都是糊的有的条带很浅，是上样量大了吗，还是loading加少了浓度大了才糊
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-04-22 17:29:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chen_xiao_xu

银虫 (正式写手)
主要是上样量的问题，一般每泳道10ug就可以了，

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2018-04-22 20:18:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

k_gq

新虫 (初入文坛)
样品：buffer=1:4
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2018-04-23 09:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蔚灵海

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看你的样品浓度吧，尽量不要让样品浓度太高，上样：将蛋白样品与2×loading buffer进行1：1混合均匀，加热处理。注意枪头不要戳破凝胶，不要过度插入梳孔使胶板变型造成漏液。
赞一下 回复此楼
4楼2018-04-23 12:43:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leister

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

loading buffer 通常是2x 的，也就是你等体积的与你的蛋白样品混合。你说的条带糊是什么样子，能贴个图上来吗？
如果是全细胞裂解液，你要注意 DNA。DNA 会让你的样品变得很粘稠，加样的时候就可以感觉得到，像鼻涕一样。这样跑出来的胶会是一片糊。snonicate 一下或者多 votex 几次时间长些就会好了。样品的量与你染色方法和目的蛋白的含量有关系。通常的考染总蛋白10ug 应该是可以的。
赞一下 回复此楼
5楼2018-05-16 13:27:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Karida_14 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:34 by Xc2FxHsHkBNc
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 5/250 2026-11-07 16:06 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 10/500 2026-11-06 12:32 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭