24小时热门版块排行榜    

查看: 1149  |  回复: 4
【悬赏金币】回答本帖问题,作者Karida_14将赠送您 10 个金币

Karida_14

新虫 (小有名气)

[求助] sds page求解决跑胶问题,希望能跑的美观已有2人参与

我想问sds-page的loading buffer的用量如何来确定,怎么样才能跑出清晰好看的条带,包括上样量一般经验值加多少?我跑胶的泳道有的一条都是糊的有的条带很浅,是上样量大了吗,还是loading加少了浓度大了才糊
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chen_xiao_xu

银虫 (正式写手)

主要是上样量的问题,一般每泳道10ug就可以了,

发自小木虫Android客户端
2楼2018-04-22 20:18:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

k_gq

新虫 (初入文坛)

样品:buffer=1:4
3楼2018-04-23 09:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蔚灵海

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看你的样品浓度吧,尽量不要让样品浓度太高,上样:将蛋白样品与2×loading buffer进行1:1混合均匀,加热处理。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变型造成漏液。
4楼2018-04-23 12:43:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leister

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

loading buffer 通常是2x 的,也就是你等体积的与你的蛋白样品混合。你说的条带糊是什么样子,能贴个图上来吗?
如果是全细胞裂解液,你要注意 DNA。DNA 会让你的样品变得很粘稠,加样的时候就可以感觉得到,像鼻涕一样。这样跑出来的胶会是一片糊。snonicate 一下或者多 votex 几次时间长些就会好了。样品的量与你染色方法和目的蛋白的含量有关系。通常的考染总蛋白10ug 应该是可以的。
5楼2018-05-16 13:27:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Karida_14 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 蹲一个男朋友 +29 伊伊莎贝拉 2024-05-17 58/2900 2024-05-24 13:22 by 1219173232
[教师之家] 女博士高校择业三天之内签合同,求支招 +31 chengmy19 2024-05-23 42/2100 2024-05-24 13:00 by jjsfb
[基金申请] 山东省基金:作为项目负责人承担面上项目数量累计不得超过2项 +7 未岸亡灵 2024-05-23 11/550 2024-05-24 11:32 by 未岸亡灵
[基金申请] 化学口面上 +7 乐丰松庆 2024-05-23 13/650 2024-05-24 10:42 by LNP@mRNA
[硕博家园] 博士复试,申请成绩复核,有机会翻盘吗? +18 长海二声笑 2024-05-21 25/1250 2024-05-24 09:17 by 1219173232
[硕博家园] 又见奇葩学生,可咋办 +27 appleapple2 2024-05-17 32/1600 2024-05-24 09:13 by yanglp
[基金申请] 化学B口多少分能上会呀 +7 WOWO159357 2024-05-22 17/850 2024-05-24 09:00 by 一路向东
[硕博家园] 博三一直没文章怎么办 +30 133456 2024-05-17 48/2400 2024-05-24 08:53 by 超级无敌华子
[硕博家园] 人生 +12 暮色恋伊人 2024-05-22 12/600 2024-05-24 08:49 by yanglp
[有机交流] TsCl保护羟基为什么不反应 +8 853015158 2024-05-21 28/1400 2024-05-24 07:32 by 88817753
[论文投稿] 共同通讯谁投稿? 20+3 qvhm2609 2024-05-23 7/350 2024-05-23 23:42 by peterrjp
[基金申请] 审不上青基又非升即走的青椒 和 牢里踩缝纫机的犯人哪个活的更舒服一点? +19 非非飞远了 2024-05-20 22/1100 2024-05-23 21:09 by chengmy19
[基金申请] 基金评审 +5 阿呆不呆 2024-05-20 5/250 2024-05-23 20:57 by 3001160025
[考博] 大扩招 +13 version211 2024-05-21 19/950 2024-05-23 20:46 by keyaner23
[硕博家园] 又忍不住想吐槽文科的学术圈 +9 nvizqxuf 2024-05-18 11/550 2024-05-23 18:15 by zqwcr
[考博] 海南大学国家级人才田新龙教授团队氢燃料电池与器件方向招收科研助理 (重点支持方向) +7 Dreammzp 2024-05-17 11/550 2024-05-23 15:56 by Dreammzp
[论文投稿] 为什么有的影响因子高的期刊分区不高呢? +7 安处一室 2024-05-21 7/350 2024-05-23 15:51 by 晓目崇
[硕博家园] 超过35岁的海外博士还可以进高校吗? +6 905452934 2024-05-20 7/350 2024-05-23 07:54 by luwangba
[论文投稿] Angew拒稿重投经历大修返回又送审了 48+4 YOONAZHA 2024-05-18 6/300 2024-05-21 10:35 by jurkat.1640
[基金申请] 这个模块怎么成了烧香拜佛的地方了 +7 shrz98 2024-05-18 7/350 2024-05-21 10:26 by lancet0903
信息提示
请填处理意见