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双双。

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白诱导表达

请问蛋白诱导后,应该取多少菌液,加多少buffer ?分子量为15,分离胶浓度为15%,为什么我跑完电泳条带很模糊?

@youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)


drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-05-04 21:12:14
我一般在筛选克隆阶段取500ul诱导4-6h,离心后加100ul裂解buffer,分别上5,10ul看诱导表达情况,条带模糊的话注意100℃煮5-10分钟后离心上样。

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2楼2018-04-18 14:33:09
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双双。

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-04-18 14:33:09
我一般在筛选克隆阶段取500ul诱导4-6h,离心后加100ul裂解buffer,分别上5,10ul看诱导表达情况,条带模糊的话注意100℃煮5-10分钟后离心上样。

嗯嗯,感谢解答,你有没有遇到过诱导之前菌液出现很多丝状的东西?是不是真菌污染呀

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3楼2018-04-19 13:21:55
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)

菌液离心,称量沉淀重量,按照1(g):10(ml)的量加入复溶液,根据Loading浓度加入适量,煮沸,离心,上样5ul即可

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只有拼出来的美丽,没有等出来的辉煌!
4楼2018-05-04 21:04:23
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