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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白诱导表达
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双双。

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白诱导表达

请问蛋白诱导后，应该取多少菌液，加多少buffer ？分子量为15，分离胶浓度为15%，为什么我跑完电泳条带很模糊？

@youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2018-04-18 14:26:57
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)
★
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-05-04 21:12:14
我一般在筛选克隆阶段取500ul诱导4-6h，离心后加100ul裂解buffer,分别上5，10ul看诱导表达情况，条带模糊的话注意100℃煮5-10分钟后离心上样。

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2楼2018-04-18 14:33:09
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双双。

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-04-18 14:33:09
我一般在筛选克隆阶段取500ul诱导4-6h，离心后加100ul裂解buffer,分别上5，10ul看诱导表达情况，条带模糊的话注意100℃煮5-10分钟后离心上样。

嗯嗯，感谢解答，你有没有遇到过诱导之前菌液出现很多丝状的东西？是不是真菌污染呀

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3楼2018-04-19 13:21:55
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)
菌液离心，称量沉淀重量，按照1（g）:10（ml）的量加入复溶液，根据Loading浓度加入适量，煮沸，离心，上样5ul即可

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只有拼出来的美丽，没有等出来的辉煌！
4楼2018-05-04 21:04:23
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