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yuevis

铜虫 (小有名气)

[求助] 芽孢杆菌基因敲除问题 已有1人参与

请问,我构建了芽孢杆菌的敲除质粒,同源臂加目的基因的质粒,之后转化进行敲除,对于后面转化敲除不明白希望能得到解答。敲除需要重组酶吗,我把质粒转化进入芽孢杆菌,涂板过夜,挑菌验证就行了吗,这样就能发生重组了吗?文献里只是写转化质粒就行了,为什么转化完就能自动发生重组?重组时间有规定吗,过夜培养就行了?实在是不懂,求解答
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547star

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yuevis at 2018-04-24 00:19:28
芽孢杆菌自身重组酶效率高吗
...

不算太高。做整合或敲除,转化效率也是一个重要影响因素,如果没有筛选标记,连转化和没有转化都区分不开的话,很难做。
为什么
9楼2018-04-24 11:19:59
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yuevis

铜虫 (小有名气)

2楼2018-04-09 17:35:04
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young1983

木虫 (正式写手)

如果转化效率高是可以发生重组的,只是效率较低。

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-04-10 13:32:15
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yuevis

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by young1983 at 2018-04-10 13:32:15
如果转化效率高是可以发生重组的,只是效率较低。

怎么提高效率呢

发自小木虫Android客户端
4楼2018-04-10 15:53:38
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