24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1810  |  回复: 10
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

mixy

铜虫 (初入文坛)

[交流] pcr产物切胶回收浓度低

重复多次,pcr产物切胶后回收浓度一直很低,在30-40ng/ul之间徘徊。哪位高人指教一下?万分感谢

谢谢大家。补充说明一下:我的片段长度为4.8kb,用的回收试剂盒是takara的,回收用的双蒸水也经过了加热,pcr每次都是做了6管,合到一管进行回收,加的洗脱液(双蒸水)为最小体积25ul

[ Last edited by mixy on 2009-3-18 at 21:16 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spring0304

木虫 (小有名气)

1.多做几管
2.洗脱液要65度水浴,且一定要加在柱膜上,一般40ul左右,要将柱膜覆盖。
5楼2009-03-21 10:26:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

zl382

铁虫 (小有名气)

多大片段?如果片段小要加异丙醇沉一下;
还有洗脱buffer或水在65度预热好洗脱效果会更好;
另外Axygen的回收试剂盒回收效果挺好的。
后退,绝对是无路可走!
2楼2009-03-18 11:07:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

用QIAGEN的试剂盒,全世界最好的,毫无疑问的……
3楼2009-03-18 11:10:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader


mixy(金币+1,VIP+0):很详细,谢~ 3-22 10:46
建议如下:
1 如果试剂盒没有问题的话,严格按照要求做就可以了(主要是乙醇一定要会发干净,否则影响回收率),最后加DNA buffer(ddH2O)洗柱的时候少加一些
2 换一个进口的试剂盒,因为切胶回收的效率本身就很低
3 在pcr的时候多做几个tube,最后混到一起纯化,洗柱的时候少加DNA buffer(ddH2O)

[ Last edited by sutao1979 on 2009-3-18 at 19:31 ]
会当凌绝顶,一览众山小
4楼2009-03-18 19:26:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +5 举个栗子oi 2026-03-24 6/300 2026-03-28 23:03 by lizhi8172
[考研] 083000学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 20:33 by 加油向未来啊
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +7 1428151015 2026-03-27 7/350 2026-03-28 19:58 by S240
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 266分,求材料冶金能源化工等调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-03-27 9/450 2026-03-28 12:22 by zllcz
[考研] 085701环境工程求调剂 +9 多久上课 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:58 by fmesaito
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 265求调剂 +8 小木虫085600 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:16 by 无际的草原
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 307求调剂 +8 超级伊昂大王 2026-03-24 9/450 2026-03-27 15:34 by 超级伊昂大王
[考研] 一志愿北化求调剂 +3 Jsman 2026-03-22 3/150 2026-03-26 21:06 by ajpv风雷
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
信息提示
请填处理意见