24小时热门版块排行榜    

查看: 1789  |  回复: 4

lzq999lzq

金虫 (著名写手)

[交流] 琼脂糖凝胶电泳时PCR产物与DNA ladder与匹配不上

每次凝胶电泳时PCR产物DNA ladder与位置对不上。

请问PCR产物在电泳前需要做预处理么?还是PCR产物是直接可以用来跑凝胶电泳?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JAY张

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lzq999lzq: 金币+1 2018-03-31 15:33:30
产物对不上看看差多少,有时候会有偏差,但偏差不大(主要看产物长度)短链偏差不能明显,如果偏差比较明显,你就要考虑你的引物是否特异,是否P出来不是目的产物,有时候电泳跑不好,也会有偏差,PCR得看用什么试剂,有些例如TAKARA,赛默飞的PCR酶和BUFFER都已经加入了染色剂,具体是什么不能说喔,这些都可以直接电泳,如果购买的是没有染色剂的,则需要加入溴酚蓝和染料,跟跑DNA一样的,看BP大小选择胶的浓度即可
2楼2018-03-30 17:42:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lzq999lzq: 金币+1 2018-03-31 15:18:07
lzq999lzq: 金币+1 2018-03-31 15:33:15
有时候ladder用的dye不见得是和你用在产物里的dye一样的 有不同的迁移率 比如neb的和thermofisher的就大概会差200bp
3楼2018-03-31 02:52:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzq999lzq

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fjtony163 at 2018-03-31 02:52:19
有时候ladder用的dye不见得是和你用在产物里的dye一样的 有不同的迁移率 比如neb的和thermofisher的就大概会差200bp

那如果用的是同一种dye呢?都是SYBR Green I.
4楼2018-03-31 15:18:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by lzq999lzq at 2018-03-31 15:18:32
那如果用的是同一种dye呢?都是SYBR Green I....

你说的是显色剂 我说的是在加样的时候不会加一种loading dye吗
5楼2018-04-01 00:09:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lzq999lzq 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +12 爱看书的可乐 2026-08-26 14/700 2026-08-26 12:49 by coolysnow
[基金申请] 系统查不到 +9 董八千 2026-08-26 9/450 2026-08-26 12:30 by yanmofang
[基金申请] 怎么查啊 +4 huang1991js 2026-08-26 4/200 2026-08-26 11:26 by panjy.cn
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +22 koalala 2026-08-24 25/1250 2026-08-26 11:14 by dxcharlary
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 出来了 +8 trojank 2026-08-26 8/400 2026-08-26 09:00 by gxc
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +8 炎黄贵胄 2026-08-22 9/450 2026-08-26 07:47 by WASM
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 19/950 2026-08-25 17:57 by chick875
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见