应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » RT-PCR
171/2返回列表12下一页
查看: 960  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

亦木水

铜虫 (小有名气)

[交流] RT-PCR

从酵母提取RNA做RT-PCR，目的片段是2.5kb
现在将PCR结果上传，请帮我看看到底什么原因
最左边是Marker最右边的是RNA,中间的是PCR产物

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-1 at 13:18 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-03-12 00:22:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亦木水

铜虫 (小有名气)
感觉最右端的不是RNA啊，虫友们怎么看
赞一下 回复此楼
2楼2009-03-12 00:23:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★
亦木水(金币+1):谢谢参与
好多染料啊
回复此楼
金币是赌出来的
3楼2009-03-12 10:10:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子739

铁虫 (小有名气)
我提出的RNA的条带也比你的大不了多少，不知道这种现象是否真确？你的目的PCR条带出现了呀，只是条带较淡，可能是PCR条件不太合适。可以改进一下PCR条件，希望你能多交流RT-PCR
赞一下 回复此楼
4楼2009-03-16 16:37:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亦木水

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 虫子739 at 2009-3-16 16:37:
我提出的RNA的条带也比你的大不了多少，不知道这种现象是否真确？你的目的PCR条带出现了呀，只是条带较淡，可能是PCR条件不太合适。可以改进一下PCR条件，希望你能多交流RT-PCR

我重复过，但一直就没重复出来，图上的结果太淡回收出来什么也没有。
估计还是RNA提的问题，我用的是Takara的isoregent提的，效果不咋的。
RT-PCR也是买的Takara的kit，里面的步骤和其他查的资料上有点不同，这个实验我已经忙了几个月了。。。
痛苦
赞一下 回复此楼
5楼2009-03-17 12:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子739

铁虫 (小有名气)
噢，我也做了一个多月了！老是会碰到一些棘手的问题！我用的也是Takara的RNAiso试剂，我说呢，怎么跟我提取的RNA条带相似，原来用的一个厂家的东西！每次5S 都比较亮。、
听说天根的RNA提取试剂盒不错，你要有条件试试，别忘了公布一下结果哦！
听说Takara的反转录酶可以，不用买试剂盒。我用的是天根的反转录试剂盒，我也还对此产品持着怀疑态度！
赞一下 回复此楼
6楼2009-03-18 12:13:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子739

铁虫 (小有名气)
建议你把条带淡的，做下二次PCR，看效果如何？关注着~祝你好运
赞一下 回复此楼
7楼2009-03-18 12:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangtengxu

木虫 (正式写手)
本人也在为RNA质量烦恼中
时好时不好
赞一下 回复此楼
想和有趣的人一起做有趣的事。
8楼2009-03-20 16:00:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
rna的质量做rtpcr足够了，pcr条带也出来了，我觉得pcr条件优化一下，或者用pcr产物当模板再做一轮pcr应该就行了

试剂方面还是trizol+SuperScript III最好
赞一下 回复此楼
9楼2009-03-20 17:12:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2009/3/20, 17:12:
试剂方面还是trizol+SuperScript III最好

支持，trizol是很经典很稳定的试剂
而SuperScript III则是目前世界上最好的逆转录酶，当然也很贵
如果负担不起可以考虑用invitrogen的M-MLV
赞一下 回复此楼
10楼2009-03-20 17:47:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 亦木水 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 289求调剂 +14 硕星赴 2026-03-23 14/700 2026-03-25 22:22 by 544594351
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +9 RichLi_ 2026-03-25 9/450 2026-03-25 22:21 by 418490947
[考研] 材料求调剂 +4 .m.. 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:30 by peike
[考研] 求调剂，一志愿:南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +6 @taotao 2026-03-19 6/300 2026-03-25 08:37 by 木托莫露露
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 材料与化工（0856）304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭